BD Brain Heart Infusion Agar with 10% Sheep Blood

ISTRUZIONI PER L'USO
TERRENI SU PIASTRA
PRONTI ALL'USO
PA-255544.02
Rev.: giugno 2003
BD Brain Heart Infusion Agar with 10% Sheep Blood
USO PREVISTO
BD Brain Heart Infusion Agar with 10% Sheep Blood (agar infuso di cuore e cervello con
10% di sangue di montone) è utilizzato per l'isolamento e la coltura di batteri esigenti e altri
organismi, in particolare quelli che richiedono sangue per la crescita. Il terreno può essere usato
anche per la coltura di funghi patogeni e Actinomycetales aerobi. Le piastre sono riempite in
profondità per consentire un periodo di incubazione più lungo.
PRINCIPI E SPIEGAZIONE DELLA PROCEDURA
Metodo microbiologico.
L'infuso di cuore e cervello si è dimostrato efficace per la coltura di un’ampia varietà di
microrganismi, inclusi diversi tipi di patogeni, ed è stato usato come base per nuovi terreni di
coltura, una volta arricchito con sangue di montone. L'agar infuso di cuore e cervello è
consigliato come terreno universale per la batteriologia aerobica e l'isolamento primario di
funghi e Actinomycetales da campioni clinici.1-3
BD Brain Heart Infusion Agar with 10% Sheep Blood può essere usato per isolare un'ampia
gamma di organismi esigenti che richiedono sangue e crescono con difficoltà su terreni non
arricchiti.1-4 Il terreno, tuttavia, non è adatto per rilevare le reazioni emolitiche, in quanto
l'elevata concentrazione di sangue spesso impedisce il completo schiarimento del terreno
circostante le colonie da parte dei fattori emolitici degli organismi.
I peptoni e l’infuso forniscono azoto organico, carbonio, zolfo, vitamine e micronutrienti. Il
glucosio fornisce i carboidrati utilizzati da gran parte dei microrganismi attraverso la
fermentazione. Il terreno viene tamponato con il fosfato. Il sangue defibrinato di montone
fornisce fattori essenziali per la crescita degli organismi più esigenti. Questo terreno su piastra
ha un livello di riempimento superiore per contrastare il restringimento dovuto al lungo periodo
di incubazione.
REAGENTI
BD Brain Heart Infusion Agar with 10% Sheep Blood
Formula* per litro di acqua purificata
Infuso di cuore e cervello (solidi)
8,0 g
Digerito peptico di tessuto animale
5,0
Digerito pancreatico di caseina
16,0
Cloruro di sodio
5,0
Glucosio
2,0
Fosfato di sodio dibasico
2,5
Agar
13,5
Sangue defibrinato di montone
10%
pH 7,4 ± 0,2
*Compensata e/o corretta per soddisfare i criteri di rendimento.
PRECAUZIONI
. Solo per uso professionale.
Non usare le piastre se presentano tracce di contaminazione microbica, alterazioni cromatiche,
essiccamento, fissurazioni o altri segni di deterioramento.
Per maneggiare i prodotti in condizioni asettiche, riconoscere i rischi biologici e smaltire i
prodotti usati, consultare le ISTRUZIONI GENERALI PER L'USO.
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CONSERVAZIONE E VITA UTILE
Alla consegna, conservare le piastre al buio a 2 – 8 °C nella confezione originaria fino a
immediatamente prima dell'uso. Evitare congelamento e surriscaldamento. Le piastre possono
essere inoculate sino alla data di scadenza (v. l'etichetta sulla confezione) e incubate per i
tempi di incubazione raccomandati.
Le piastre prelevate dalle confezioni da 10 già aperte possono essere usate per una settimana
se conservate in luogo pulito a 2 – 8 °C.
CONTROLLO DI QUALITÀ A CURA DELL’UTENTE
Inoculare i campioni rappresentativi con i seguenti ceppi (per informazioni più dettagliate, v.
INFORMAZIONI GENERALI PER L'USO). Incubare batteri e Candida albicans a 35 – 37 °C per
24 – 48 h e incubare Trichophyton per 3 – 5 giorni in atmosfera aerobica.
Ceppi
Risultati della crescita
Colonie bianche, micelio bianco
Trichophyton mentagrophytes
ATCC 28185
Candida albicans ATCC 60193
Colonie bianche
Listeria monocytogenes ATCC 19112
Colonie bianco-grigiastre
Shigella flexneri ATCC 12022
Colonie grigie
Streptococcus pneumoniae ATCC 6305
Colonie grigio-verdastre, eventualmente
mucoidi
Non inoculate
Rosso intenso (color sangue)
PROCEDURA
Materiali forniti
BD Brain Heart Infusion Agar with 10% Sheep Blood (piastre impilate Stacker da 90 mm,
peso di riempimento 30 g). Microbiologicamente controllate.
Materiali non forniti
Terreni di coltura accessori, reagenti e apparecchiature di laboratorio necessarie.
Tipi di campioni
Il terreno può essere usato con tutti i tipi di campioni se si sospetta un'infezione causata da
organismi esigenti e a lenta crescita, ma non deve essere utilizzato come terreno universale per
l'isolamento primario (v. anche PRESTAZIONI METODOLOGICHE E LIMITAZIONI DELLA
PROCEDURA).
Procedura del test
Strisciare il campione non appena perviene in laboratorio, usando un’ansa sterile da inoculo
per isolare le colonie. Per informazioni sul trattamento e l'incubazione dei campioni, consultare
le relative voci della bibliografia.3,4
Per isolare i funghi nei campioni potenzialmente contaminati, inoculare oltre al terreno non
selettivo anche un terreno selettivo, ad es. BD Sabouraud Agar with Chloramphenicol, BD
Sabouraud Agar with Gentamicin and Chloramphenicol o BD Sabouraud Agar with
Penicillin and Streptomycin. Incubare le piastre a 25 – 30 °C in posizione invertita,
aumentando l’umidità. Per isolare i funghi che causano micosi sistemiche e gli Actinomycetales
aerobi, inoculare due terreni uguali e lasciarli in incubazione, uno a 25 – 30 °C, l'altro a 35 –
37 °C. La temperatura di incubazione più elevata consente la crescita di altri patogeni batterici.
Aggiungere anche altri terreni in base alla diagnosi clinica e agli agenti che potrebbero causare
l'infezione.
Esaminare le colture almeno una volta alla settimana per verificare la crescita e conservarle
per 4 – 6 settimane prima di refertarle come negative.
Risultati
Dopo un adeguato periodo di incubazione, le piastre mostreranno colonie isolate nelle aree
strisciate e crescita convergente nelle aree dove l'inoculazione è stata più marcata.
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Ricercare sulle piastre colonie di funghi e/o batteri con colorazione e morfologia tipiche. Per la
conferma dei risultati, è necessario eseguire test biochimici e/o procedure sierologiche. Per
ulteriori informazioni consultare le relative voci della bibliografia.3,4
PRESTAZIONI METODOLOGICHE E LIMITAZIONI DELLA PROCEDURA
Il terreno viene usato per l'isolamento e la coltura di un'ampia gamma di funghi, inclusi quelli
delle micosi sistemiche, Actinomycetales aerobi e altri batteri.1,3-5
A causa della natura non selettiva di BD Brain Heart Infusion Agar with 10% Sheep Blood, è
necessario strisciare i campioni ampiamente contaminati da flora normale anche su terreni
selettivi adatti per impedire la crescita eccessiva di organismi contaminanti.
L'elevata concentrazione di sangue di montone rende il terreno inadatto a rivelare le reazioni
emolitiche.
BD Brain Heart Infusion Agar with 10% Sheep Blood non viene usato come terreno generico
per l'isolamento di batteri a crescita rapida da campioni clinici.
BIBLIOGRAFIA
1. Creitz, J.R., and T.F. Puckett. 1954. A method for cultural identification of Coccidioides
immitis. Am. J. Clin. Pathol. 24:1318-1323.
2. Nash, P., and M.M. Krenz. 1991. Culture media, p. 1226-1288. In : A. Balows, W.J.
Hausler, Jr., K.L. Herrmann, H.D. Isenberg, and H.J. Shadomy (ed.), Manual of clinical
microbiology, 5th ed. American Society for Microbiology, Washington, D.C.
3. Sutton, D.A. 2003. Specimen collection, transport, and processing: mycology. In: Murray, P. R.,
E. J. Baron, J.H. Jorgensen, M. A. Pfaller, and R. H. Yolken (ed.). Manual of clinical
microbiology, 8th ed. American Society for Microbiology, Washington, D.C.
4. Brown, J.M, and M.M. McNeil. 2003. Nocardia, Rhodococcus, Gordonia, Actinomadura,
Streptomyces and other aerobic actinomycetes. In: Murray, P. R., E. J. Baron, J.H.
Jorgensen, M. A. Pfaller, and R. H. Yolken (ed.). Manual of clinical microbiology, 8th ed.
American Society for Microbiology, Washington, D.C.
5. Sutton, D.A. 2003. Specimen collection, transport, and processing: mycology. In: Murray, P.
R., E. J. Baron, J.H. Jorgensen, M. A. Pfaller, and R. H. Yolken (ed.). Manual of clinical
microbiology, 8th ed. American Society for Microbiology, Washington, D.C.
CONFEZIONE/DISPONIBILITÀ
BD Brain Heart Infusion Agar with 10% Sheep Blood
N. di cat. 255544
Terreni su piastra pronti all'uso, confezioni da 20
ULTERIORI INFORMAZIONI
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