Para-Pak® PLUS EcoFix - Meridian Bioscience Europe

Para-Pak® PLUS EcoFix®
ITALIANO
REF Cat. No. 950620 (200 TESTS) – 950605 (50 TESTS)
IVD per uso diagnostico in vitro
FINALITÀ D'USO
Para-Pak® PLUS EcoFix® è un sistema standardizzato per la raccolta, il trasporto, la fissazione, la
filtrazione dei campioni fecali per la ricerca di parassiti intestinali. I campioni fissati con il fissativo
EcoFix® possono essere utilizzati sia per la concentrazione che per la colorazione permanente.
Questo fissativo è un eccellente mezzo per risolvere i problemi legati alla non immediata consegna
del campione fecale.
SPIEGAZIONE
La diagnosi di infezioni intestinali causate da parassiti è confermata dal ritrovamento e
l’identificazione di uova e larve di elminti o trofozoiti e cisti di protozoi. Non sempre è possibile
assicurare un trasporto tempestivo del campione fecale fresco al laboratorio, inoltre i carichi di
lavoro e le priorità del laboratorio non sempre permettono un immediato esame del campione fecale
fresco. In questi casi le tecniche di incubazione, refrigerazione o congelamento non garantiscono la
conservazione di tutte le forme diagnostiche di ciascun parassita (1,2,3,4,5,6,7).
Un corretto uso di Para-Pak® PLUS EcoFix® assicura invece che tutti gli stadi diagnostici dei parassiti
intestinali siano preservati se presenti nel materiale fecale. Para-Pak® PLUS EcoFix® è stato
sviluppato come sistema di fissazione in risposta alle problematiche di gestione riguardanti i fissativi
contenenti formalina e mercurio(8).
PRINCIPI CHIMICI E FISICI
EcoFix® fornisce un sistema di fissazione non contenente mercurio o formalina ideale per molte
procedure parassitologiche. Campioni fissati con EcoFix® possono essere concentrati ed utilizzati per
preparare vetrini per la colorazione permanente.
COMPONENTI DEL KIT
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Flaconi contenenti 13 ml di fissativo EcoFix® con un dispositivo di raccolta del
campione ed un sistema di filtrazione integrato nel tappo.
Surfattante
Spatole in legno
Istruzioni complete per l’operatore professionale
Foglietto di istruzioni per la corretta raccolta delle feci da parte del personale
infermieristico o da parte del paziente stesso.
MATERIALE NECESSARIO MA NON FORNITO
• Colorante di Lugol (REF. FK5305)
• Vetrini per microscopia e vetrini coprioggetto
• Microscopio
Per effettuare la procedura standard di concentrazione, servono anche
• Provette per centrifuga da 15 ml
• Soluzione fisiologica salina (o formalina 10%)
• Etile-acetato (REF. FK4318) o Hemo-De (REF. 801300)
• Tamponi di cotone
• Applicatori con punta in cotone
• Centrifuga
STABILITÀ e CONSERVAZIONE
Conservare a temperatura ambiente in posizione verticale, in luogo ben areato. Evitare esposizione
al calore o alla luce diretta. La vita media è di 2 anni dalla data di preparazione, se conservato a
temperatura ambiente. Fare riferimento alla scadenza sulle etichette.
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PROTOCOLLO
Il sistema Para-Pak® PLUS EcoFix® consente l’utilizzo di gran parte delle tecniche parassitologiche
comunemente in uso. Le seguenti procedure non sono le sole utilizzabili e molte altre alternative
possono essere adottate.
PRECAUZIONI relative alla RACCOLTA DEL CAMPIONE
1. I campioni fecali in origine devono essere freschi e non trattati. I campioni fecali freschi
dovrebbero essere fissati entro 30 minuti dalla raccolta.
2. I pazienti dovrebbero essere avvisati di non assumere antiacidi, bario, bismuto, farmaci
antidiarroici o lassativi a base di oli prima della raccolta del campione.
3. Per assicurare l’evidenziazione degli elementi parassitari che vengono emessi in modo
discontinuo ed in quantità variabile, si consiglia di esaminare tre campioni emessi ad alcuni giorni
di distanza l’uno dall’altro.
4. Il campione non deve essere contaminato da urina.
5. Occorre fornire al paziente opportune istruzioni
STEP 1 – RACCOLTA del CAMPIONE
1. Il campione teoricamente dovrebbe essere raccolto in una padella o in altro contenitore a bocca
larga e non deve essere contaminato con le urine. In alternativa si può applicare un foglio di
pellicola di materiale plastico sul sedile del water per permettere la raccolta del campione.
2. Si raccomanda di raccogliere un campione significativo di feci (ad es., dalle aree che si
presentano sanguinolente o mucoidi) utilizzando la spatola di legno fornita, e di riempire una
sola volta il dispositivo per il prelievo standardizzato del campione, che si trova attaccato al
coperchio del contenitore: in questo modo verrà prelevato circa 1 ml (o 1 g) di feci. Non
aggiungere materiale in eccesso a quanto la cavità del dispositivo di prelievo può contenerne. Le
feci liquide possono essere raccolte con un cucchiaino. Un quantitativo di feci diverso da quello
indicato può influenzare negativamente i risultati.
3. Richiudere bene il contenitore ed agitarlo vigorosamente, per ottenere una adeguata
miscelazione del campione. Alla fine dell'operazione il campione dovrebbe avere un aspetto
omogeneo e non dovrebbero essere presenti grumi di materiale fecale.
4. Inviare il contenitore al laboratorio dopo aver registrato il nome del paziente sull'etichetta.
STEP 2 – TRATTAMENTO ed ANALISI DEL CAMPIONE
1. Nel caso di feci mucoidi, aggiungere 5-10 gocce di surfattante attraverso il tappo del dispositivo.
2. Miscelare accuratamente il campione in EcoFix®.
Il campione così raccolto può ora essere analizzato direttamente (fare riferimento alla sezione
ANALISI DIRETTA del CAMPIONE) oppure concentrato prima dell’analisi microscopica (proseguire
direttamente con la sezione CONCENTRAZIONE ED ANALISI del CAMPIONE)
ANALISI DIRETTA del CAMPIONE
A. Esame macroscopico diretto:
Registrare la presenza nelle feci di sangue, vermi, muco o proglottidi.
B. Esame microscopico diretto (ESAME A FRESCO)
1. Porre una goccia di soluzione fisiologica salina su un vetrino per microscopia (NOTA: per
l’esame diretto il Lugol non può essere utilizzato per la colorazione dei campioni).
2. Togliere il cappuccio verde, invertire il dispositivo e premendo delicatamente sulle pareti
depositare una goccia di campione fecale fissato in EcoFix® sulla goccia di salina. Miscelare
delicatamente con un bastoncino. Lo spessore dello striscio deve essere tale da permettere
appena la lettura dei caratteri di stampa attraverso il preparato.
3. Coprire con un vetrino coprioggetto ed esaminare immediatamente.
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C. Colorazione permanente:
1. Preparate uno striscio permanente:togliere il cappuccio verde, invertire il dispositivo e premendo
delicatamente sulle pareti depositare una goccia di campione fecale fissato in EcoFix® su un
vetrino.
2. Lasciar asciugare il vetrino per una notte.
3. Per la Colorazione Tricromica fare riferimento alla procedura nelle istruzioni del KIT EcoStainTM
(REF. 801400). In alternative, per procedure standard, fare riferimento al Manual of Clinical
Microbiology ASM publication, 5th ed., 1991.
CONCENTRAZIONE ED ANALISI del CAMPIONE
A. CONCENTRAZIONE CON ETILE-ACETATO/SALINA
1. Miscelare accuratamente il campione fissato in EcoFix®. Togliere il cappuccio verde, invertire il
dispositivo e premendo delicatamente sulle pareti filtrare almeno 5 ml di campione attraverso il
filtro, in una provetta da centrifuga da 15 ml (se opportuno, l‘intero contenuto del dispositivo
può essere filtrato).
2. Centrifugare a 500 x g per 10 min (1800-2200 rpm per la maggior parte delle centrifughe da
banco)
3. Decantare il sovranatante . Dovrebbe rimanere un sedimento di circa 0.5 -1.0 ml. Se necessario
aggiungere ulteriore materiale filtrato e ripetere i passaggi 2 e 3.
NOTA: se il pellet ottenuto al punto 3 contiene molti detriti, è opportuno effettuare un ulteriore passaggio di
lavaggio. Risospendere il sedimento in 7 ml di soluzione fisiologica salina, miscelare, e ri-centrifugare a 500 x g.
Eliminare il sovranatante e procedere al punto 4.
4. Aggiungere al sedimento 9 ml di soluzione fisiologica (o formalina 10%), miscelare ed attendere
per 10 minuti.
5. Aggiungere 3 ml di Etile-Acetato (o di Hemo-De), agitare bene per 30 secondi, rimuovere il
tappo della provetta per eliminare la pressione creatasi all’interno dopo l’agitazione e quindi
richiudere.
6. Centrifugare per 10 min. a 500-1000 xg (1800-2200 rpm per le comuni centrifughe da
banco).Dopo la centrifugazione saranno presenti nella provetta 4 fasi, che dall’alto saranno:
a. Strato Superiore: etile-acetato (o Hemo-De)
b. Secondo strato: tappo di detriti e fibre
c. Terzo Strato: soluzione salina (o formalina)
d. Sedimento contenente i parassiti
7. Staccare dalle pareti del tubo il tappo di detriti con un tampone di cotone, capovolgere il tubo e
decantare con attenzione le tre fasi superiori tenendo il sedimento. Mantenendo il tubo
capovolto, utilizzare un tampone di cotone per rimuovere l’eccesso di Etile Acetato (o Hemo-De)
rimasto sulle pareti del tubo. In questo modo si evita la formazione di bolle di solvente nella
preparazione a fresco.
B. PREPARAZIONE DEL VETRINO
ANALISI A FRESCO
1. Aggiungere alcune gocce di soluzione fisiologica (o formalina al 10% ) per risospendere il
sedimento.
NOTA: la risospensione in formalina al 10% è raccomandata se l’osservazione microscopica non
viene effettuata immediatamente. Se lo striscio preparato risulta troppo denso (lo spessore dello
striscio deve essere tale da permettere appena la lettura dei caratteri di stampa attraverso il
preparato) aggiungere ancora salina (o formalina al 10%). Non usare EcoFix® per risospendere il
pellet se si intende effettuare colorazione con iodio. Per l’esame microscopico a fresco sono
consigliate sia la preparazione del vetrino con soluzione salina che con Soluzione di Lugol.
2. Usando una pipetta usa e getta miscelare accuratamente il sedimento. Aggiungere una goccia di
sedimento risospeso ad ogni vetrino.
3. Eventualmente colorare il sedimento aggiungendo poche gocce di Soluzione di Iodio (Lugol)
4. Coprire lo striscio con un vetrino coprioggetto doppio ed esaminare con microscopio seguendo le
procedure standard.
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COLORAZIONE PERMANENTE
1. Risospendere il sedimento rimanente in poche gocce di EcoFix®
2. Preparate uno striscio permanente e lasciar asciugare il vetrino per una notte.
3. Per la Colorazione Tricromica fare riferimento alla procedura nelle istruzioni del KIT
EcoStainTM (REF. 801400). In alternativa, per procedure standard, fare riferimento al
Manual of Clinical Microbiology ASM publication, 5th ed., 1991.
PRECAUZIONI GENERALI
1. Destinato esclusivamente ad uso professionale
2. A causa della potenziale natura infettiva dei campioni fecali non fissati, lavorare con cautela.
Indossare guanti di protezione durante la manipolazione e lavare in modo opportuno le mani.
3. Tutti i campioni fecali non fissati possono contenere HIV o altri agenti infettivi e devono essere
manipolati da personale specializzato ed eliminati come si trattasse di materiale biologicamente
pericoloso.
4. Evitare il contatto del fissativo con la cute e gli occhi. Evitare di respirarne i vapori. Qualora
avvenga una contaminazione lavare abbondantemente con acqua corrente e contattare un medico in
caso di irritazione.
5. I fissativi sono velenosi. In caso di ingestione rivolgersi al centro anti-veleni o ad un medico.
6. Smaltire in accordo con le normative vigenti ed in conformità con le normative locali
7. Non utilizzare il kit dopo la data di scadenza riportata sulla confezione
INFORMAZIONI SULLA SICUREZZA
PRODOTTO: EcoFix®
Indicazione di pericolo
Xi -Irritante.
F -Facilmente infiammabile.
N -Pericoloso per l'ambiente.
RASI DI RISCHIO "R"
R11 -Facilmente infiammabile.R36 -Irritante per gli occhi. R51/53 -Tossico per gli organismi
acquatici, può provocare a lungo termine effetti negativi per l'ambiente acquatico.
FRASI DI SICUREZZA "S"
S60 -Questo materiale e il suo contenitore devono essere smaltiti come rifiuti pericolosi.S61 -Non
disperdere nell'ambiente. Riferirsi alle istruzioni speciali /Schede informative in materia di sicurezza.
S 9 -Conservare il recipiente in luogo ben ventilato.S24/25 -Evitare il contatto con gli occhi e con la
pelle.S45 -In caso di incidente o di malessere consultare immediatamente il medico (se possibile,
mostrargli l'etichetta).
BIBLIOGRAFIA
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Brook, M.M. 1974. "Intestinal and Urogenital Protozoa", Manual of clinical Microbiology, ASM, Washington,
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Technique Coprologique Novelle Essentiellment Destinee a la Concentration des
Trophozoites d'Amibes. Bul. Soc. Pathol. Exot., 65:390-398.
4. Melvin, D.M. and M.M. Brooke. 1980. "Laboratory Preocedures for the Diagnosis of Intestinal Parasites",
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650.65
8
REV. 2006-04-13
Manufactured for
Via dell’ Industria, 7
20020 Villa Cortese (MI) Italy
Tel.: +39 0331 433636 - Fax: +39 0331 433616
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Fax: +31 (411) 62 48 41
e-mail: [email protected]
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455, Promenade des Anglais
06299 Nice Cedex-3
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Tel.: +33 (0) 493187210
Fax: +33 (0) 493187211
e-mail: [email protected]
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Rue de l’Industrie 7
1400 Nivelles
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Tel.: +32 (67) 895959
Fax: +32 (67) 895958
e-mail: [email protected]
Use By / Utilizzare entro / Utiliser jusque / Fecha de caducidad / Verwendbar bis
Batch Code / Codice del lotto / Code du lot / Código de lote / Chargenbezeichnung
In Vitro Diagnostic Medical Device / Dispositivo medico-diagnostico in vitro / Dispositif
médical de diagnostic in vitro / Producto sanitario para diagnóstico in vitro / In-VitroDiagnostikum
This product fulfills the requirements of Directive 98/79/EC on in vitro diagnostic medical
devices / Questo prodotto soddisfa i requisti della Direttiva 98/79/CE sui dispositivi
medico-diagnostici in vitro / Ce produit répond aux exigences de la Directive 98/79 CE
relative aux dispositifs médicaux de diagnostic in vitro / Este producto cumple con las
exigencias de la Directiva 98/79/CE sobre los productos sanitarios para diagnóstico in vitro
/ Dieses Produkt entspricht den Anforderungen der Richtlinie über In Vitro Diagnostica
98/79/EG.
Consuucciones de uso / Gebrauchsanweisung beachtenlt Instructions for Use / Consultare
le istruzioni per l’uso / Consulter les instructions d’utilisation / Consulte las instr
ORDER INFORMATION – INFORMAZIONI PER GLI ORDINI
Collection and Fixation components – Sistemi di raccolta e fissazione
• Para-Pak® PLUS EcoFix® (Ref. 950620) - 200 tests
• Para-Pak® PLUS EcoFix® (Ref. 950605) - 50 tests
Reagents – Reagenti
• Ethyl Acetate 225 ml (Ref. FK4318)
• Hemo-De 400 ml (Ref.801300)
• Iodine Ampules 50 units/ 1ml each (Ref. 5305)
• EcoStainTM set (REF. 801400) – reagents set for Trichrome staining EcoFix® preparations
Concentration components – Componenti per la concentrazione
• Tubes and caps (Ref. 800400) - 500 centrifuge tubes (15 ml) and caps
• Spin-Con® (Ref. 972200) – 200 filtering units for concentration without chemicals
• Spin-Con® (Ref. 972500) – 500 filtering units for concentration without chemicals
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