EnVision™ FLEX Mini Kit, High pH (Dako Omnis)

EnVision™ FLEX Mini Kit, High pH (Dako Omnis)
Code GV823
2a edizione
Il kit contiene i reagenti sufficienti per 150 test. Per strumenti Dako Omnis.
Reagenti facoltativi:
Codice
Nome prodotto
Test
GV804
EnVision™ FLEX Target Retrieval Solution, High pH (50x)
(Dako Omnis)
225
GV805
EnVision™ FLEX Target Retrieval Solution, Low pH (50x)
(Dako Omnis)
225
GC807
Wash Buffer (20x) (Dako Omnis)
GC808
Hematoxylin (Dako Omnis)
600
GV809
EnVision™ FLEX+ Rabbit LINKER (Dako Omnis)
75
GV821
EnVision™ FLEX+ Mouse LINKER (Dako Omnis)
75
GV825
EnVision™ FLEX DAB+ Substrate Chromogen System
(Dako Omnis)
150
Altre opzioni:
K8020
(128741-001)
FLEX IHC Microscope Slides
500
P04123IT_001_GV823/2015.05 p. 1/12
Sommario
Pagina
Uso previsto.................................................................................................................................. 3
Cenni introduttivi........................................................................................................................... 3
Reagents (Reagenti)..................................................................................................................... 4
A. Materiali forniti ..................................................................................................................... 4
B. Materiali necessari ma non forniti......................................................................................... 4
C. Reagenti facoltativi .............................................................................................................. 5
Precauzioni................................................................................................................................... 6
Conservazione.............................................................................................................................. 7
Preparazione dei reagenti............................................................................................................. 7
Raccolta e preparazione del campione ......................................................................................... 8
Procedura..................................................................................................................................... 8
Procedura di colorazione.......................................................................................................... 8
Controllo di qualità...................................................................................................................... 10
Interpretazione dei risultati.......................................................................................................... 11
Limiti........................................................................................................................................... 11
Spiegazione dei simboli .............................................................................................................. 12
(128741-001)
P04123IT_001_GV823/2015.05 p. 2/12
Uso previsto
Per uso diagnostico in vitro.
Il sistema di visualizzazione EnVision™ FLEX Mini Kit, High pH (Dako Omnis) è destinato all'utilizzo in
ambito immunoistochimico in combinazione con strumenti Dako Omnis. Il sistema rileva gli anticorpi
primari di tipo e di coniglio e visualizza la reazione mediante il prodotto EnVision™ FLEX DAB+
Chromogen. Se utilizzato con EnVision™ FLEX+ Rabbit LINKER (codice GV809) o EnVision™ FLEX+
Mouse LINKER (codice GV821), è possibile ottenere un'amplificazione del segnale degli anticorpi
primari di coniglio o di topo, rispettivamente. I reagenti EnVision™ FLEX sono idonei per essere
utilizzati su sezioni di tessuto fissate in formalina e incluse in paraffina.
Cenni introduttivi
EnVision™ FLEX è un sistema di visualizzazione flessibile e progettato per offrire risultati di
colorazione ottimali sugli strumenti Dako Omnis quando si utilizza il protocollo consigliato in questo
foglio informativo.
Prima della colorazione, le sezioni di tessuto fissate in formalina e incluse in paraffina vengano
sottoposte a deparaffinazione e idratazione sullo strumento e da smascheramento antigenico
termoindotto (HIER, Heat-Induced Epitope Retrieval) con il reagente di smascheramento antigenico
specificato nel foglietto informativo dell'anticorpo primario. Questo kit include EnVision™ FLEX Target
Retrieval Solution, High pH (50x) (DM848). In alternativa, si consigliano EnVision™ FLEX Target
Retrieval Solution, High pH (50x) (codice GV804) o EnVision™ FLEX Target Retrieval Solution, Low
pH (50x) (codice GV805). Alcuni anticorpi primari necessitano di un pretrattamento enzimatico del
tessuto anziché di un trattamento HIER per assicurare una colorazione ottimale.
Bloccare la perossidasi endogena utilizzando il reagente EnVision™ FLEX Peroxidase-Blocking
Reagent (DM841) incluso nel kit. Vista l'efficacia della procedura di lavaggio e la presenza di proteine
stabilizzanti nei reagenti Dako, non sono necessarie fasi di bloccaggio extra per ridurre la colorazione
aspecifica dello sfondo.
Si consiglia di utilizzare Wash Buffer (20x) (GC807), disponibile come reagente facoltativo.
Gli anticorpi primari non sono forniti con il kit. Si consiglia di utilizzare gli anticorpi Dako FLEX Readyto-Use Primary Antibody o gli anticorpi Primary Antibody concentrati Dako (per le linee guida sul loro
utilizzo, consultare i relativi foglietti informativi).
Per un'amplificazione facoltativa del segnale degli anticorpi primari di coniglio, è possibile applicare
EnVision™ FLEX+ Rabbit (LINKER) (codice GV809). Per l'amplificazione del segnale di anticorpi
primari di topo, è possibile utilizzare EnVision™ FLEX+ Mouse (LINKER) (codice GV821). Come
suggerimento: EnVision™ FLEX+ Rabbit LINKER consente un'amplificazione del segnale di 2-3 volte,
mentre EnVision™ FLEX+ Mouse LINKER offre un'amplificazione del segnale di 4-5 volte.
Il reagente Dako EnVision™ FLEX /HRP (DM842), contenuto nel kit, è costituito da una catena di
destrano alla quale sono state legate diverse molecole di perossidasi di rafano (HRP) e di anticorpo
secondario. Per l'appaiamento entra in gioco una speciale reazione chimica che consente il legame di
un massimo di 100 molecole di HRP e un massimo di 20 molecole di anticorpo per ogni catena.
Il sistema substrato contenuto nel kit è costituito da due componenti: EnVision™ FLEX DAB+
Chromogen (DM847), soluzione concentrata di diaminobenzidina (DAB), e EnVision™ FLEX Substrate
Buffer (DM843), tampone contenente perossido di idrogeno. Prima dell'uso è necessario diluire
EnVision™ FLEX DAB+ Chromogen in EnVision™ FLEX Substrate Buffer. Il sistema substrato genera
un prodotto di colore marrone intenso nel sito dell'antigene bersaglio. La miscelazione di cromogeno e
tampone viene eseguita al momento opportuno sullo strumento Dako Omnis in modo automatico.
Per la colorazione di contrasto, si consiglia di utilizzare Hematoxylin (codice GC808). Il reagente
fornisce una colorazione nucleare azzurro chiaro.
Montare le sezioni di tessuto colorate con un mezzo di montaggio basato su solvente organico.
(128741-001)
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Reagenti
A. Materiali forniti
DM841
EnVision™ FLEX Peroxidase-Blocking Reagent (Dako Omnis)
2 x 22,5 mL, pronto all'uso
Tampone fosfato contenente perossido di idrogeno, NaN3 15 mmol/L e
detergente.
DM842
EnVision™ FLEX /HRP (Dako Omnis)
2 x 22,5 mL, pronto all'uso
Destrano accoppiato a molecole di perossidasi e a molecole di anticorpo
secondario di capra diretto contro immunoglobuline di coniglio e di topo. In
soluzione tamponata contenente proteina stabilizzante e conservante.
DM847
EnVision™ FLEX DAB+ Chromogen (Dako Omnis)
2 x 1 mL
3,3'-diaminobenzidina tetracloridrato in solvente organico.
Il colore di questo reagente può variare da viola intenso a neutro senza
incidere sulle prestazioni del kit.
DM843
EnVision™ FLEX Substrate Buffer (Dako Omnis)
4 x 26 mL
Soluzione tamponata contenente perossido di idrogeno e conservante.
DM848
EnVision™ FLEX Target Retrieval Solution, High pH (50x) (Dako Omnis)
3 x 68 mL, concentrazione 50x
Tampone Tris/EDTA, pH 9
B. Materiali necessari ma non forniti
Diluente per anticorpo, ad esempio Dako Antibody Diluent (codice S0809)
Clearify Clearing Agent (codice GC810)
Dako FLEX Ready-to-Use Primary Antibodies o anticorpi primari di coniglio o topo concentrati a
marchio Dako opportunamente diluiti
Strumento Dako Omnis
Utensili per strumentazione Dako Omnis
Dako Proteinase K, Ready-to-Use (se necessario) (codice S3020)
FLEX Universal Negative Control, Rabbit, Ready-to-Use (codice GA600), FLEX Universal Negative
Control, Mouse, Ready-to-Use (codice GA750) o un reagente appropriato di controllo negativo per
l'anticorpo primario
Hematoxylin (Dako Omnis) (codice GC808) o un reagente appropriato per colorazione di contrasto con
ematossilina
Vetrini per microscopio, ad esempio FLEX IHC Microscope Slides (codice K8020)
Mezzo di montaggio (basato su solvente organico) e vetrini coprioggetto
Wash Buffer (20x) (Dako Omnis) (codice GC807)
0.3 M Sulfuric Acid (codice GC203)
(128741-001)
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C. Reagenti facoltativi
GV804
DM848
EnVision™ FLEX Target Retrieval Solution, High pH (50x) (Dako Omnis)
3 x 68 mL, concentrazione 50x
Tampone Tris/EDTA, pH 9
GV805
DM849
EnVision™ FLEX Target Retrieval Solution, Low pH (50x) (Dako Omnis)
3 x 68 mL, concentrazione 50x
Tampone citrato, pH 6.1
GC807
DM851
GC808
DM846
Wash Buffer (20x) (Dako Omnis)
20 x 175 mL, concentrazione 20x
Soluzione salina tamponata-Tris contenente Tween 20, pH 7.6 (±0,1).
Hematoxylin (Dako Omnis)
8 x 22,5 mL, pronto all'uso
Soluzione acquosa di ematossilina.
GV809
DM845
EnVision™ FLEX+ Rabbit LINKER (Dako Omnis)
1 x 22,5 mL, pronto all'uso
Soluzione tamponata contenente proteina stabilizzante e un agente
antimicrobico.
GV821
DM844
GV825
DM847 +
DM843
EnVision™ FLEX+ Mouse LINKER (Dako Omnis)
1 x 22,5 mL, pronto all'uso
Soluzione tamponata contenente proteina stabilizzante e un agente
antimicrobico.
EnVision™ FLEX DAB+ Substrate Chromogen System (Dako Omnis)
EnVision™ FLEX DAB+ Chromogen (Dako Omnis)
2 x 1 mL
3,3'-diaminobenzidina tetracloridrato in solvente organico.
Il colore di questo reagente può variare da viola intenso a neutro senza incidere
sulle prestazioni del kit.
EnVision™ FLEX Substrate Buffer (Dako Omnis)
4 x 26 mL
Soluzione tamponata contenente perossido di idrogeno e conservante.
(128741-001)
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Precauzioni
1.
2.
3.
4.
Per operatori specializzati.
EnVision™ FLEX+ /HRP contiene materiale di origine animale; inoltre, non è possibile escludere la
presenza di tracce di materiale umano associate al processo produttivo. Adottare le normali
procedure previste per il trattamento dei prodotti di origine biologica.
Non esporre EnVision™ FLEX Peroxidase-Blocking Reagent, EnVision™ FLEX /HRP, EnVision™
FLEX Substrate Buffer, EnVision™ FLEX DAB+ Chromogen o EnVision™ FLEX Substrate
Working Solution a fonti di luce intensa.
EnVision™ FLEX Target Retrieval Solution, High pH (50x) contiene 5-10% trometamolo, 1-5%
nonoxinolo e 1-5% acido acetico, (ethylenedinitrilo)tetra-, sale disodico, diidrato. EnVision™ FLEX
Target Retrieval Solution, High pH (50x) è etichettato:
Attenzione
Provoca grave irritazione oculare.
Tossico per gli organismi acquatici con effetti di lunga durata.
Indossare guanti protettivi. Fare uso di un dispositivo di protezione degli
occhi o del viso. Indossare indumenti protettivi.
P273
Non disperdere nell’ambiente.
P264
Lavare accuratamente le mani dopo l'uso.
P305 + P351 +
IN CASO DI CONTATTO CON GLI OCCHI: sciacquare accuratamente per
P338
parecchi minuti. Togliere le eventuali lenti a contatto se è agevole farlo.
Continuare a sciacquare.
P337 + P313
Se l’irritazione degli occhi persiste, consultare un medico.
P501
Smaltire il prodotto e il recipiente in conformità a tutte le normative locali,
regionali, nazionali e internazionali.
Su richiesta, è disponibile una scheda di sicurezza per utenti professionisti per EnVision™ FLEX
Peroxidase-Blocking Reagent.
EnVision™ FLEX DAB+ Chromogen contiene 1–5% tetracloruro di bifenil-3,3',4,4'tetrailtetraammonio e riporta l’etichetta:
H319
H411
P280
5.
6.
Pericolo
H350
H341
P201
P202
P280
7.
8.
Può provocare il cancro.
Sospettato di provocare alterazioni genetiche.
Procurarsi istruzioni specifiche prima dell’uso.
Non manipolare prima di avere letto e compreso tutte le avvertenze.
Indossare guanti protettivi. Fare uso di un dispositivo di protezione degli occhi
o del viso. Indossare indumenti protettivi.
P308 + P313
IN CASO di esposizione o di possibile esposizione: Richiedere assistenza
medica.
P405
Conservare sotto chiave.
P501
Smaltire il prodotto e il recipiente in conformità a tutte le normative locali,
regionali, nazionali e internazionali.
Di regola, non è consentito ai minori di 18 anni di lavorare con questo prodotto.
Gli utenti devono essere accuratamente informati relativamente alla procedura di lavoro adeguata,
alle proprietà pericolose del prodotto e alle istruzioni di sicurezza necessarie. Fare riferimento alla
scheda di sicurezza (MSDS) per ulteriori informazioni.
Indossare dispositivi di protezione individuale appropriati per evitare il contatto con gli occhi e la
cute.
La soluzione non utilizzata deve essere smaltita in conformità alle normative locali e nazionali
vigenti in materia.
(128741-001)
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Conservazione
Conservare EnVision™ FLEX Target Retrieval Solution, High pH (50x) a 2-8 °C. Conservare
EnVision™ FLEX Peroxidase-Blocking Reagent, EnVision™ FLEX /HRP, EnVision™ FLEX DAB+
Chromogen ed EnVision™ FLEX Substrate Buffer in un luogo buio a 2-8 °C con il coperchio ben
chiuso.
La stabilità sullo strumento di EnVision™ FLEX Peroxidase-Blocking Reagent, EnVision™ FLEX /HRP,
EnVision™ FLEX DAB+ Chromogen ed EnVision™ FLEX Substrate Buffer è di 75 ore. La stabilità sullo
strumento delle soluzioni EnVision FLEX™ Target Retrieval Solution, High pH e Low pH diluite è di 7
giorni. Il software Dako Omnis tiene traccia del tempo di stabilità sullo strumento rimanente.
Non utilizzare dopo la data di scadenza stampata sui flaconi. Se i reagenti sono conservati in
condizioni diverse da quelle specificate, le loro condizioni dovranno essere verificate dall'utente. Se si
osserva una colorazione inattesa non imputabile a variazioni delle procedure di laboratorio e si
sospetta un problema dovuto al prodotto, contattare l'Assistenza tecnica Dako.
Preparazione dei reagenti
A.1 EnVision™ FLEX Target Retrieval Solution, High pH (50x) (DM848, codice GV804) o
EnVision™ FLEX Target Retrieval Solution, Low pH (50x) (DM849, codice GV805)
Preparare una soluzione di lavoro diluendo EnVision™ FLEX Target Retrieval Solution, High pH (50x)
o Low pH (50x) nella proporzione 1:50 in acqua distillata o deionizzata. Si consiglia di attenersi alla
procedura descritta di seguito:
1. Riempire una bottiglia di carico Dako Omnis con acqua distillata o deionizzata fino alla linea di
riempimento (3,325 L). Prima di procedere al riempimento, assicurarsi che il piano su cui è
posizionata la bottiglia non sia inclinato.
2. Versare i 68 mL della bottiglia di soluzione concentrata EnVision™ FLEX Target Retrieval Solution,
High pH (50x) o Low pH (50x) (Dako Omnis) nella bottiglia di carico.
3. Applicare l'etichetta staccabile della bottiglia della soluzione concentrata sulla bottiglia di carico.
4. Chiudere il coperchio e capovolgere delicatamente la bottiglia 2-3 volte.
La soluzione diluita inutilizzata può essere conservata a 2-8 °C per un mese. Conservata sullo
strumento Dako Omnis, la soluzione diluita può essere utilizzata entro 7 giorni. Eliminare la soluzione
se appare torbida.
A.2 Wash Buffer (20x) (DM851, codice GC807)
Preparare una soluzione di lavoro in una bottiglia di carico Dako Omnis diluendo la soluzione Wash
Buffer (20x) (Dako Omnis) 1:20 con acqua distillata o deionizzata. Per ridurre al minimo la formazione
di schiuma, si consiglia di attenersi alla procedura descritta di seguito:
1. Riempire una bottiglia di carico Dako Omnis con acqua distillata o deionizzata fino alla linea di
riempimento (3,325 L). Prima di procedere al riempimento, assicurarsi che il piano su cui è
posizionata la bottiglia non sia inclinato.
2. Versare i 175 mL della bottiglia di soluzione concentrata Wash Buffer (20x) (Dako Omnis) nella
bottiglia di carico.
3. Applicare l'etichetta staccabile della bottiglia della soluzione concentrata sulla bottiglia di carico.
4. Chiudere il coperchio e capovolgere delicatamente la bottiglia 2-3 volte.
La soluzione diluita inutilizzata può essere conservata a 2-8 °C per un mese. Conservata sullo
strumento Dako Omnis, la soluzione diluita può essere utilizzata entro 7 giorni. Il software Dako Omnis
tiene traccia del tempo di stabilità sullo strumento rimanente. Eliminare la soluzione se appare torbida.
A.3 EnVision™ FLEX Substrate Working Solution
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La soluzione EnVision™ FLEX Substrate Working Solution contenente DAB viene preparata sullo
strumento Dako Omnis. Una parte di EnVision™ FLEX DAB+ Chromogen (DM847) viene miscelata
con 50 parti di EnVision™ FLEX Substrate Buffer (DM843) con un processo automatizzato. La
soluzione Substrate Working Solution viene sempre preparata per un solo rack (contenente 1-5 vetrini)
per volta. I volumi forniti sono sufficienti per il caricamento di 50 rack.
Raccolta e preparazione del campione
I campioni devono essere delle sezioni di tessuto fissate in formalina e incluse in paraffina.
Il tempo di fissazione dipende dal fissativo e dal tipo/spessore di tessuto. Per esempio, i blocchi di
tessuto con spessore di 3-4 mm devono essere fissati in formalina tamponata neutra per 18-24 ore.
Lo spessore ottimale delle sezioni incluse in paraffina è di 4 µm.
I campioni devono essere montati su vetrini per microscopio. Affinché le sezioni di tessuto aderiscano
perfettamente ai vetrini, si consiglia di utilizzare FLEX IHC Microscope Slides (codice K8020).
Montare le sezioni sui vetrini distendendole il più possibile, finché non risultano completamente lisce. I
risultati della colorazione possono essere compromessi dalla presenza di un numero eccessivo di
pieghe.
NOTA: le dimensioni dei vetrini per microscopio devono essere adeguate ai requisiti dello strumento
Dako Omnis in uso. Per una definizione dei vetrini per microscopio idonei, consultare il documento
"Dako Omnis Manuale utente di base".
Montare le sezioni in paraffina da un bagnomaria preriscaldato contenente acqua distillata o
deionizzata. Il bagnomaria non deve contenere additivi quali gelatina, polilisina, ecc. Asciugare le
sezioni al calore, a una temperatura in genere non superiore a 60 °C per un massimo di 60 minuti. Per
far sì che le sezioni aderiscano perfettamente ai vetrini, prima di avviare la fase di asciugatura
rimuovere tutta l'acqua intrappolata sotto.
Procedura
Il sistema di visualizzazione EnVision™ FLEX è stato sviluppato per l'uso sullo strumento Dako Omnis
in combinazione con anticorpi primari Dako.
La procedura automatizzata su Dako Omnis comprende la deparaffinazione, lo smascheramento
antigenico termoindotto, la colorazione immunoistochimica e la colorazione di contrasto di sezioni
tissutali fissate in formalina e incluse in paraffina. I passaggi dei protocolli relativi alle procedure
automatizzate possono essere visualizzati, stampati e modificati in base ai manuali utente Dako Omnis
di base e avanzato.
La procedura di pretrattamento e il protocollo di colorazione sono dipendenti dall'anticorpo. Fare
riferimento al foglietto informativo dell'anticorpo primario Dako corrispondente.
Prima di eseguire i protocolli sullo strumento Dako Omnis, leggere attentamente il documento "Dako
Omnis Manuale utente di base".
Il protocollo EnVision™ FLEX è preimpostato nel software Dako Omnis. Per istruzioni dettagliate sulla
preparazione dello strumento per la colorazione, fare riferimento al documento "Dako Omnis Manuale
utente di base"; per istruzioni dettagliate sui protocolli, consultare Dako Omnis Advanced User Guide
(Dako Omnis Manuale utente avanzato).
Procedura di colorazione
Quando si usano gli anticorpi FLEX RTU Primary Antibodies per Dako Omnis, il protocollo di
colorazione ottimale viene impostato nel software Dako Omnis.
Per informazioni sul metodo di pretrattamento da applicare e sui tempi di incubazione, fare riferimento
ai singoli foglietti informativi degli anticorpi FLEX RTU Primary Antibody o degli anticorpi Primary
Antibody concentrati Dako. Per una più agevole impostazione di nuovi protocolli, si consiglia di usare
uno dei modelli di protocollo riportati di seguito.
In Workstation Dako Omnis, scegliere uno dei tre modelli di protocollo contenenti i passaggi di
colorazione e i tempi di incubazione consigliati per il sistema di visualizzazione EnVision™ FLEX (per
una panoramica, fare riferimento alla tabella 2):
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FLEX
FLEX+ Mouse
FLEX+ Rabbit
I modelli di protocollo possono essere utilizzati per la generazione di protocolli personalizzati per
anticorpi primari specifici. È possibile personalizzare i seguenti passaggi:
• Reagente per smascheramento antigenico (per smascheramento antigenico termoindotto),
temperatura e tempo di incubazione
• Anticorpo primario e tempo di incubazione
• Tempo di incubazione del polimero marcato (esclusivamente riduzione)
• Reagente per colorazione di contrasto e tempo di incubazione
L'utente deve verificare il protocollo applicato.
Se i protocolli non sono disponibili nel sistema Dako Omnis, rivolgersi all'Assistenza tecnica Dako.
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Tabella 2. Panoramica dei modelli di protocollo per EnVision™ FLEX/FLEX+.
Passaggio
Reagent (Reagente)
Sparaffinatura
Clearify Clearing Agent
Recupero
bersaglio
EnVision™ FLEX Target
Retrieval Solution, High pH
oppure
EnVision™ FLEX Target
Retrieval Solution, Low pH
oppure
Reagente personalizzato
97±2 ˚C*
30 min*
97±2 ˚C*
30 min*
97±2 ˚C*
30 min*
Lavaggio
Primary Antibody
(Anticorpo
primario)
Wash Buffer (Dako Omnis)
20 min*
lavaggio
20 min*
lavaggio
20 min*
lavaggio
20 min*
Lavaggio
Endogenous
Enzyme Block
(Blocco enzima
endogeno)
Lavaggio
Secondary
Reagent
(Reagente
secondario)
Lavaggio
Polimero marcato
Wash Buffer (Dako Omnis)
EnVision™ FLEX PeroxidaseBlocking Reagent
lavaggio
3 min
lavaggio
3 min
lavaggio
3 min
Wash Buffer (Dako Omnis)
EnVision™ FLEX+ Mouse
oppure
lavaggio
-
lavaggio
Mouse LINKER
10 min
lavaggio
Rabbit LINKER
10 min
Wash Buffer (Dako Omnis)
EnVision™ FLEX/HRP
20 min*
lavaggio
20 min*
lavaggio
20 min*
Lavaggio
Lavaggio
Substrato
cromogeno
Lavaggio
Colorazione di
contrasto
Wash Buffer (Dako Omnis)
Wash Buffer (Dako Omnis)
EnVision™ FLEX Substrate
Working Solution
Wash Buffer (Dako Omnis)
Hematoxylin (Dako Omnis)*
lavaggio
lavaggio
5 min
lavaggio
lavaggio
5 min
lavaggio
lavaggio
5 min
lavaggio
3 min*
lavaggio
3 min*
lavaggio
3 min*
Lavaggio
Lavaggio
Acqua deionizzata
Wash Buffer (Dako Omnis)
lavaggio
lavaggio
lavaggio
lavaggio
lavaggio
lavaggio
Colorazione
di contrasto
Colorazione
Recupero
bersaglio
Sparaffinatura
Fase
Modello di protocollo di colorazione
FLEX
FLEX+ Mouse
FLEX+ Rabbit
sì
sì
sì
Rabbit LINKER
* La personalizzazione è consentita.
Procedura post-colorazione
1. Una volta completato il ciclo, rimuovere il rack dei vetrini da Unloading Station (Stazione di
scaricamento) e trasferire i rack in acqua deionizzata pulita.
2. Disidratare, diafanizzare e montare i vetrini con un mezzo di montaggio permanente e vetrini
coprioggetto.
Controllo di qualità
Ogni seduta di colorazione dovrebbe includere un campione di controllo positivo noto per confermare
che le prestazioni di tutti i reagenti siano adeguate. Se il campione di controllo positivo non produce
una colorazione positiva, la marcatura dei campioni analizzati non può essere considerata valida.
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È necessario includere un reagente di controllo negativo con ogni campione per identificare l'eventuale
colorazione aspecifica. Se non è possibile distinguere la colorazione aspecifica dalla colorazione
specifica, la marcatura dei campioni di analisi non può essere considerata valida.
Interpretazione dei risultati
La soluzione Substrate Working Solution contenente diaminobenzidina produce un colore marrone nel
sito dell'antigene bersaglio che viene riconosciuto dall'anticorpo primario. Il colore marrone deve essere
visibile nel campione di controllo positivo nel punto in cui è prevista la presenza dell'antigene bersaglio.
L'eventuale colorazione aspecifica sarà di tipo marrone piuttosto diffuso e interesserà i vetrini sottoposti
a trattamento con il reagente di controllo negativo. I nuclei risulteranno blu a causa della colorazione di
contrasto a base di ematossilina.
Limiti
1. Esclusivamente per procedure automatizzate su strumenti Dako Omnis. Quando si eseguono
colorazioni con anticorpi primari concentrati Dako, la procedura ottimale deve essere determinata e
verificata dall'utente.
2. Usare solo su sezioni di tessuto fissate in formalina e incluse in paraffina. Quando si usano sezioni
congelate o strisci cellulari, la procedura ottimale va determinata e verificata a cura dell'utente,
salvo diverse indicazioni riportate nel foglietto informativo del Dako Primary Antibody specifico. Le
variazioni della procedura possono influire sul numero di test forniti nel kit.
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Spiegazione dei simboli
Numero di catalogo
Limiti di temperatura
Codice lotto
Pittogrammi di pericolo GHS
(consultare la sezione
relative alle precauzioni)
Dispositivo medico
diagnostico in vitro
Conservare al buio
Data di scadenza
Pittogrammi di pericolo GHS
(consultare la sezione
relative alle precauzioni)
Consultare le istruzioni
per l'uso
Contiene materiale per <n>
test
Produttore
I sistemi Dako EnVision™ sono coperti dal Brevetto USA n. 5.543.332 e dal Brevetto Europeo n. 594.772.
Prodotto da:
Dako Denmark A/S
Produktionsvej 42
DK-2600 Glostrup
Danimarca
Tel. +45 44 85 95 00
Fax +45 44 85 95 95
www.dako.com
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