DiaClon Anti-M / DiaClon Anti-N

DiaClon Anti-M / DiaClon Anti-N
Deutsch
monoklonal, IgG-Antikörper, für Röhrchentest
Bestimmung der Antigene M (MNS1) und N (MNS2)
DiaClon Anti-M / DiaClon Anti-N
B103052 09.13
English
monoclonal, IgG antibody, for tube test
Determination of antigens M (MNS1) and N (MNS2)
DiaClon Anti-M / DiaClon Anti-N
B103052 09.13
Français
monoclonal, anticorps IgG, pour test en tube
Détermination des antigènes M (MNS1) et N (MNS2)
B103052 09.13
Produkt-Identifikation: M: 17030 / N: 17141
Product-Identification: M: 17030 / N: 17141
Identification de produit : M : 17030 / N : 17141
EINLEITUNG
INTRODUCTION
INTRODUCTION
Glycophorin A (GPA), eine der wichtigsten, Sialsäure enthaltenden Strukturen der Erythrozytenmembran, ist der Träger der M (MNS1)- und N (MNS2)antigenen Determinanten.
M (MNS1) and N (MNS2) antigenic determinants are carried on glycophorin A (GPA), one of the major sialic acid containing structures of the red cell membrane.
Les déterminants antigéniques M (MNS1) et N (MNS2) sont portés sur la glycophorine A (GPA), l’une des principales structures de la membrane des hématies
contenant de l’acide sialique.
Nach Mollison [1] sind die Phänotypen des MN-Systems bei der kaukasischen Bevölkerung mit folgender Häufigkeit anzutreffen:
MM . . . . . . . 28%
MN . . . . . . . 50%
NN . . . . . . . 22%
Die Antigene M und N sind antithetisch. Erythrozyten weisen mit seltenen Ausnahmen M+N-, M-N+ oder M+N+ auf und sind homozygot für M bzw. N
oder heterozygot für beide.
Die Beurteilung von Reaktionen mit Anti-M- und Anti-N-Seren erfordert besondere Sorgfalt. Abweichungen können zwischen Testseren humanen Ursprungs,
von Kaninchen, Lectinen oder monoklonalen Reagenzien festgestellt werden.
Das Glycophorin B (GPB) ist Träger des bestimmenden Faktors für das Antigen S (MNS3) und s (MNS4) und exprimiert gleichtzeitig das N-Antigen.
Daher kann es mit einigen Anti-N Seren zu einer Kreuzreaktion bei homozygotem Vorliegen des M Antigenes kommen. Es können auch bei Vorliegen
von N- und M-Varianten unerwartete Reaktionen auftreten; z.B. das seltene Antigen Mg (MNS11) ist codiert von einem Gen, das eigentlich kein N- oder
M-Antigen produziert. Fälschlicherweise können daher Erythrozyten als NN oder NM klassifiziert werden, obwohl sie NMg oder MMg genotypisiert sind.
Mc (MNS8) ist ein weiteres seltenes Allel auf dem M- und N-Gen, das mit den meisten Anti-M Seren und einigen Anti-N Seren reagiert. Me (MNS13),
ist eine Determinante, die auch auf dem M- und He-Antigen vorhanden ist; somit können einige Anti-M Seren auch die Komponente Anti-Me enthalten.
Besonders bei Vaterschaftsgutachten können diese diskrepanten Ergebnisse in der MN-Typisierung von immenser Bedeutung sein.
M- und N-Bestimmung wird auch zur Bestätigung der Spezifität der Alloantikörper durchgeführt. Anti-M und Anti-N werden in der Regel nicht als klinisch
relevant erachtet, es sei denn, dass sie bei 37 °C reaktiv sind. In diesem Fall ist die MN-Bestimmung von Spenderblut wichtig, damit entsprechende
Antigen-negative Spender bei der Durchführung der Kreuzprobe ausgewählt werden können.
According to Mollison [1], the phenotype frequencies of the MN system in the Caucasian population are as follows:
MM . . . . . . . 28%
MN . . . . . . . 50%
NN . . . . . . . 22%
The M and N antigens bear an antithetical relationship. Red cells, with rare exeptions, type as M+N-, M-N+ or M+N+, representing apparent double dose
antigen expression for M, N, and single dose expression for both respectively.
Interpretation of results with anti-M and anti-N sera requires particular care. Discrepancies may be observed between results obtained with test sera of
human origin, from rabbits, lectins and monoclonal reagents.
Glycophorin B (GPB) carries the S (MNS3), s (MNS4) antigenic determinants and also expresses the ˝N˝ antigen. Some anti-N sera may therefore cross
react with red cells carrying double dose of the M antigen. Unexpected results may also occur when variants of the M and N antigens are present,
for example, the rare Mg (MNS11) antigen which is encoded by a gene which produces virtually no M or N antigen. Red cells can therefore be erroneously
classified NN or NM when they are genotypically NMg or MMg. Mc (MNS8) is another rare allele of M and N which reacts with the majority of anti-M sera
and some anti-N sera. Me (MNS13) is a determinant shared by M and He antigens and some anti-M sera also contain an anti-Me component.
These potential sources of discrepant results of MN typing can be of particular importance in parentage testing.
M and N typing is also undertaken in order to help confirm allo-antibody specificity. Anti-M and anti-N are not normally considered to be of clinical
significance unless reactive at 37 °C. In this case, MN typing of donor blood is important so that appropriate antigen negative units may be selected
before crossmatching.
Selon Mollison [1], la fréquence des phénotypes du système MN, dans la population caucasoïde est la suivante :
MM . . . . . . . 28%
MN . . . . . . . 50%
NN . . . . . . . 22%
Les antigènes M et N sont antithétiques. Les hématies, à quelques exceptions près, sont M+N-, M-N+ ou M+N+ montrant respectivement une homozygotie
pour M, une homozygotie pour N et une hétérozygotie à la fois pour M et N.
L’interprétation des résultats obtenus avec les anticorps anti-M et anti-N nécessite beaucoup de précautions. Des discordances peuvent être observées
selon qu’on utilise soit un sérum-test d’origine humaine, soit un sérum-test de lapin, soit des lectines, soit des anticorps monoclonaux.
Glycophérine B (GPB) transporte les déterminants antigèniques S (MNS3), s (MNS4) et également l‘expression de l‘antigène N. Quelques anti sérums
peuvent provoquer des réactions croisées  avec l’antigène M en double dose. Des résultats imprévus peuvent également survenir en présence de
variants de l‘antigène M et N, comme par exemple le rare antigène Mg (MNS11) lequel est encodé par un gène ne produisant pas virtuellement des antigènes M et N. Les hématies peuvent cependant être classifiées par erreur NN ou NM quand elles sont génotypés NMg ou MMg. Mc (MNS8) est un autre
alléle rare de M et N réagissant avec la majorité des anti-sérums Anti-M et quelques anti-N. Me (MNS13) est un déterminant partagé par les antigènes
M et He et quelques antisérums Anti-M contiennent un composant anti-Me. Ces sources potentiels de résultats discordants lors du typage MN peuvent
etre particulièrement importantes lors de test de recherche de parternité.
La détermination des antigènes M et N est également effectuée pour aider à confirmer la spécificité des allo-anticorps. Normalement, on ne pense pas
que les anti-M et anti-N aient une importance clinique, à moins qu’ils ne réagissent à 37 °C. Dans ce cas, la détermination du MN du sang du donneur
est important afin de choisir des unités négatives d’antigènes correspondants, avant l’épreuve croisée.
REAGENZIEN
REAGENTS
RÉACTIFS
Monoklonale Antikörper (Maus Hybridom), flüssig, in 2 ml Fläschchen.
Gebrauchsfertig, nicht verdünnen!
Monoclonal antibodies (mouse hybridoma), liquid, in 2 ml vials.
Ready for use, do not dilute!
Anticorps monoclonaux (hybridomes de murins), liquides, en flacons de 2 ml.
Prêt à l’emploi, ne diluez pas!
Konservierungsmittel: < 0,1% NaN3.
Preservative: < 0.1% NaN3.
Conservateur : < 0,1% NaN3.
• ˝DiaClon Anti-M˝ (Zellinie LM110/140 [LM1]).
• ˝DiaClon Anti-N˝ (Zellinie LN3).
• ˝DiaClon Anti-M˝ (cell line LM110/140 [LM1]).
• ˝DiaClon Anti-N˝ (cell line LN3).
• ˝DiaClon Anti-M˝ (lignée cellulaire LM110/140 [LM1]).
• ˝DiaClon Anti-N˝ (lignée cellulaire LN3).
Achtung: Alle Reagenzien sollten als potentiell infektiös gehandhabt werden.
Caution: All reagents should be treated as potentially infectious.
Attention : Tout réactif doit être considéré comme potentiellement infectieux.
Stabilität: siehe Verfallsdatum auf dem Etikett.
Stability: see expiry date on label.
Stabilité : voir la date de péremption sur l’étiquette.
ZUSÄTZLICH BENÖTIGTE REAGENZIEN
ADDITIONAL REAGENTS REQUIRED
RÉACTIFS SUPPLÉMENTAIRES NÉCESSAIRES
•0,9%ige isotonische Kochsalzlösung zur Herstellung der Erythrozytensuspension.
• Isotonic saline solution 0.9% for red cell suspension.
• Solution saline isotonique 0,9% pour suspensions d’hématies.
WEITERE ERFORDERLICHE MATERIALIEN
FURTHER MATERIALS REQUIRED
MATÉRIAUX SUPPLÉMENTAIRES NÉCESSAIRES
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
Suspensionsröhrchen
Röhrchenständer
Pipetten 25 μl, 50 μl, 0,5 ml
Immunhämatologische Zentrifuge
Suspension tubes
Tube rack
Pipettes 25 μl, 50 μl, 0.5 ml
Immunohematological centrifuge
Tubes pour suspensions
Portoir de tubes
Pipettes 25 μl, 50 μl, 0,5 ml
Centrifugeuse immunohématologique
PROBENMATERIAL
SAMPLE MATERIAL
ÉCHANTILLONS
Für verlässliche Resultate sollte die Bestimmung mit frisch abgenommenen Proben durchgeführt werden oder in Übereinstimmung mit lokalen Laborvorschriften
für die Akzeptanz von Probenmaterial erfolgen. Vorzugsweise sollte die Probengewinnung in den Antikoagulantien Citrat, EDTA oder CPD-A erfolgen.
Native Proben (kein Antikoagulanz) können auch verwendet werden.
For optimal results, the determination should be performed using a freshly drawn sample, or in accordance with local laboratory procedures for sample
acceptance criteria. Preferably, blood samples should be drawn into citrate, EDTA or CPD-A anticoagulant. Samples drawn into plain tubes (no anticoagulant)
may also be used.
Afin d’obtenir des résultats fiables, la détermination devrait se faire sur du matériel fraîchement prélevé ou conforme aux exigences du laboratoire auquel
la demande d’analyses est adressée. L’échantillon devrait être prélevé de préférence sur anticoagulant citrate, EDTA ou CPD-A. Du sang prélevé sans
anticoagulant (natif) peut également être utilisé.
VORBEREITUNG DER BLUTPROBE
PREPARATION OF BLOOD SAMPLE
PRÉPARATION DE L’ÉCHANTILLON DE SANG
Eine 3–5%ige Erythrozytensuspension in isotonischer Kochsalzlösung wie folgt zubereiten:
Prepare a 3–5% red cell suspension in isotonic saline solution as follows:
Préparer une suspension d‘hématies à 3–5% en solution saline isotonique comme suit :
1.0,5 ml der isotonischen Kochsalzlösung in ein sauberes Glasröhrchen geben.
2.1 Tropfen (50 μl) Vollblut oder 25 μl Erythrozytenkonzentrat dazugeben; leicht mischen.
1. Dispense 0.5 ml of isotonic saline solution into a clean glass tube.
2. Add 1 drop (50 μl) of whole blood or 25 μl of packed cells; mix gently.
1. Pipetter 0,5 ml de la solution saline isotonique dans un tube en verre propre.
2.A jouter 1 goutte (50 μl) de sang total ou 25 μl de culot d’hématies ; mélanger doucement.
KONTROLLEN
CONTROLS
CONTRÔLES
Bekannte Antigen-positive und -negative Erythrozyten sollten in Übereinstimmung mit den gültigen Richtlinien zur Qualitätssicherung mitgeführt werden.
Known positive and negative samples should be included in accordance with the relevant guidelines of quality assurance.
Des échantillons positifs et négatifs connus devront être inclus en concordance avec les réglementations régissant l‘assurance qualité.
TESTDURCHFÜHRUNG
TEST PROCEDURE
MÉTHODE
Röhrchentest
Tube test
Test en tube
Reagenzien vor Gebrauch auf Raumtemperatur (18–25 °C) bringen.
Allow the reagents to reach room temperature (18–25 °C) before use.
Ramener les réactifs à température ambiante (18–25 °C) avant utilisation.
1.Ein sauberes Glasröhrchen mit Patientennamen oder -nummer beschriften.
2.1 Tropfen (50 μl) des Reagenz ˝DiaClon Anti-M˝ und/oder ˝DiaClon Anti-N˝ in das entsprechende Röhrchen pipettieren.
3.1 Tropfen (50 μl) der Erythrozytensuspension dazugeben.
4.Gut mischen und 5 Minuten bei Raumtemperatur (18–25 °C) inkubieren.
5.20 Sekunden bei 1000 g oder 1 Minute bei 125 g zentrifugieren.
6.D ie Erythrozyten vorsichtig resuspendieren und über einer indirekten Lichtquelle makroskopisch auf Agglutination beobachten.
1.Identify a clean glass tube with the patient’s name or number.
2.Pipette 1 drop (50 μl) of the reagent ˝DiaClon Anti-M˝ and/or ˝DiaClon Anti-N˝ into the appropriate tubes.
3.Add 1 drop (50 μl) of the red cell suspension.
4.Mix well and incubate for 5 minutes at room temperature (18–25 °C).
5.Centrifuge for 20 seconds at 1000 g or for 1 minute at 125 g.
6.Gently resuspend the cells and, over an indirect light source, examine macroscopically for agglutination.
1.Identifier un tube en verre propre par le nom ou le numéro du patient.
2.Pipetter 1 goutte (50 μl) du réactif ˝DiaClon Anti-M˝ et/ou ˝DiaClon Anti-N˝ dans les tubes appropriés.
3.D istribuer 1 goutte (50 μl) de la suspension d‘hématies.
4.Mélanger doucement et incuber 5 minutes à température ambiante (18–25 °C).
5.Centrifuger 20 secondes à 1000 g ou 1 minute à 125 g.
6.Resuspendre doucement les hématies et, au-dessus d’un éclairage indirect, observer l’agglutination macroscopique.
DiaClon Anti-M / DiaClon Anti-N
Français
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DiaClon Anti-M / DiaClon Anti-N
B103052 09.13
English
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Deutsch
B103052 09.13
INTERPRÉTATION DES RÉSULTATS
INTERPRETATION OF THE RESULTS
INTERPRETATION DER ERGEBNISSE
A) Principe
A) Principle
A) Prinzip
Positif :Une agglutination de + à ++++ indique une réaction entre l’anticorps et les hématies.
Positive:Agglutination of + to ++++ is indicative of a reaction between the antibody and the red cells.
Positiv:Eine Agglutination von + bis ++++ deutet auf eine Reaktion zwischen dem Antikörper und den Erythrozyten hin.
Négatif :Pas d‘agglutination visible indique l‘absence d‘une réaction entre l’anticorps et les hématies.
Negative:No visible agglutination indicates that no reaction has taken place between the antibody and the red cells.
Negativ:Das Fehlen einer sichtbaren Agglutination deutet darauf hin, dass keine Reaktion zwischen dem Antikörper und den Erythrozyten stattgefunden hat.
B)Réactions avec ˝ DiaClon Anti-M˝ et ˝ DiaClon Anti-N˝
B)Reactions with ˝ DiaClon Anti-M˝ and ˝ DiaClon Anti-N˝
B)Reaktionen ˝ DiaClon Anti-M˝ und ˝ DiaClon Anti-N˝
Une réaction positive indique la présence de l‘antigène M ou N.
Une réaction négative indique l‘absence de l‘antigène M ou N.
A positive reaction indicates the presence of the M or N antigen.
A negative reaction indicates the absence of the M or N antigen.
Eine positive Reaktion weist auf das Vorhandensein des M- oder N-Antigens hin.
Eine negative Reaktion bedeutet Abwesenheit des M- oder N-Antigens.
REMARQUES
REMARKS
ANMERKUNGEN
1.Certaines maladies telles que le myélome multiple, le syndrome des anticorps froides (SAF), sont connues pour provoquer une agrégation spontanée
des hématies. Dans la plupart des cas, le lavage préalable des hématies en solution saline isotonique chaude résout le problème.
2.Vu la nature des anticorps monoclonaux, telle que la reconnaissance d‘un seul épitope, des variations de réactions peuvent être constatées lors de la
comparaison avec des sérums-tests polyclonaux d’origine humaine. Ceci peut être dû à des variantes d‘antigènes.
1.Certain disease states, e.g. multiple myeloma and cold agglutinin disease (CAD) are known to give rise to spontaneous aggregation of red cells. In most
cases washing cells with warm isotonic saline solution prior to testing resolves the problem.
2.D ue to the nature of monoclonal antibodies, i.e. recognition of a single epitope, discrepant results (strength of reaction) may be found in comparison
with human polyclonal test sera. This may be due to antigen variants.
1.Bestimmte Krankheitszustände wie Mehrfach-Myelome und Kälteagglutinin-Krankheit (CAD) rufen eine Spontanaggregation von Erythrozyten hervor.
Meistens kann das Problem durch Waschen der Erythrozyten mit warmer isotonischer Kochsalzlösung vor dem Test beseitigt werden.
2.Bedingt durch die Art monoklonaler Antikörper, d.h. Erkennung eines einzigen Epitops, kann es im Vergleich zu humanen polyklonalen Testseren zu
abweichenden Reaktionen kommen (Reaktionsstärke). Dies kann auf Antigen-Varianten zurückgeführt werden.
LIMITES
LIMITATIONS
EINSCHRÄNKUNGEN
a)Des contaminations, bactériennes ou autres, du matériel utilisé peuvent provoquer des résultats faussement positifs ou faussement négatifs.
b)L’observation stricte des méthodes et l’emploi de l’équipement recommandé sont essentiels. L’équipement doit être régulièrement contrôlé selon les
procédures des GLP.
c)Des suspensions d’hématies trop concentrées ou trop diluées peuvent provoquer des résultats aberrants.
a)Bacterial or other contamination of materials used can cause false positive or false negative results.
b)Strict adherence to the procedures and recommended equipment is essential. The equipment should be checked regularly according to GLP procedures.
c)Too heavy or too weak red cell suspensions can cause aberrant results.
a)Bakterielle oder andere Kontaminationen des verwendeten Materials können falsch positive oder falsch negative Ergebnisse verursachen.
b)Striktes Befolgen der Anleitungen und Verwendung des erforderlichen Arbeitmaterials sind unerlässlich. Das Arbeitsmaterial sollte regelmässig entsprechend
der GLP - Richtlinien überprüft werden.
c)Zu starke oder zu schwache Erythrozytensuspensionen können abnormale Reaktionen hervorrufen.
BIBLIOGRAPHIE
BIBLIOGRAPHY
LITERATUR
Mollison, P.L., Engelfriet, C.P. and Contreras, M.: Blood Transfusion in Clinical Medicine, 10 th ed. 1997; Blackwell Scientific Publications, Oxford.
Mollison, P.L., Engelfriet, C.P. and Contreras, M.: Blood Transfusion in Clinical Medicine, 10 th ed. 1997; Blackwell Scientific Publications, Oxford.
Mollison, P.L., Engelfriet, C.P. and Contreras, M.: Blood Transfusion in Clinical Medicine, 10 th ed. 1997; Blackwell Scientific Publications, Oxford.
PRODUITS
PRODUCTS
PRODUKTE
DiaClon Anti-M
monoclonal
IgG antibody
for tube test
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Ces produits sont garantis quant à leurs propriétés et qualités stipulées sur l’étiquette et dans le mode opératoire. Le fabricant décline toute responsabilité
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Jegliche Verantwortung wird ausdrücklich abgelehnt, wenn das Präparat für andere Zwecke gebraucht oder verkauft wird.
Les modifications apportées à la version 05.10 sont colorées en gris.
Changes to the version 05.10 are shaded grey.
Änderungen zu der Version 05.10 sind grau gekennzeichnet.
DiaMed GmbH
Pra Rond 23
1785 Cressier FR
Suisse
DiaMed GmbH
Pra Rond 23
1785 Cressier FR
Switzerland
DiaMed GmbH
Pra Rond 23
1785 Cressier FR
Schweiz
DiaClon Anti-M / DiaClon Anti-N
Italiano
monoclonale, anticorpo IgG, per test in provetta
Determinazione degli antigeni M (MNS1) e N (MNS2)
DiaClon Anti-M / DiaClon Anti-N
B103052 09.13
Español
anticuerpo IgG monoclonal, para prueba en tubo
Determinación de antígenos M (MNS1) y N (MNS2) con
DiaClon Anti-M / DiaClon Anti-N
B103052 09.13
Português
monoclonal, anticorpo IgG, para teste em tubo
Determinação dos antigénios M (MNS1) e N (MNS2)
B103052 09.13
Identificazione prodotto: M: 17030 / N: 17141
Identificación del producto: M: 17030 / N: 17141
Identificação do Produto: M: 17030 / N: 17141
INTRODUZIONE
INTRODUCCIÓN
INTRODUÇÃO
La glicoforina A (GPA), una delle strutture contenenti acido sialico più importanti della membrana eritrocitaria, supporta i determinanti antigenici M
(MNS1) e N (MNS2).
La glicoforina A (GPA), una de las principales estructuras de la membrana eritrocítica que contienen ácido siálico, es la portadora de los determinantes
antígenicos M (MNS1) y N (MNS2).
Os determinantes antigénicos M (MNS1) e N (MNS2) são transportados pela glicoforina A (GPA), uma das estruturas principais da membrana eritrocitária
que contêm ácidos siálicos.
Secondo Mollison [1], la frequenza dei fenotipi del sistema MN nella popolazione di razza caucasica è la seguente:
Según Mollison [1], la frecuencia de fenotipos del sistema MN en la población caucásica es la siguiente:
Segundo Mollison [1], as frequências fenotípicas do sistema MN na população caucasiana são:
MM . . . . . . . 28%
MN . . . . . . . 50%
NN . . . . . . . 22%
MM . . . . . . . 28%
MN . . . . . . . 50%
NN . . . . . . . 22%
MM . . . . . . . 28%
MN . . . . . . . 50%
NN . . . . . . . 22%
Gli antigeni M e N sono antitetici. Salvo rare eccezioni, gli eritrociti hanno fenotipo tipizzati per M+N-, M-N+ o M+N+ esprimendo gli antigeni M e N doppia
dose o in singola dose se combinati insieme.
Los antígenos M y N mantienen una relación antitética. Con raras excepciones, los eritrocitos son M+N-, N-N+ o M+N+, lo que corresponde respectivamente
a una expresión homocigótica de M o N o heterocigótica de ambos.
Os antigénios M e N têm uma relação antitética. Os eritrócitos são, salvo raras excepções, de tipos M+N-, M-N+ ou M+N+, sendo homozigóticos para
M ou N ou heterozigóticos para ambos.
L‘interpretazione dei risultati con i sieri anti-M e anti-N richiede particolare cura. Possono osservarsi discrepanze fra i risultati ottenuti con sieri testo di
origine umana, di coniglio, lectine e reagenti monoclonali.
La interpretación de los resultados con sueros anti-M y anti-N requiere especial cuidado. Pueden observarse diferencias entre los resultados obtenidos
con antisueros reactivo de origen humano, procedentes de conejos, lectinas y reactivos monoclonales.
A interpretação dos resultados obtidos com soros anti-M e anti-N exige cuidados particulares. É possível observar discrepâncias entre os resultados
obtidos consoante forem utilizados soros teste de origem humana, de coelho, lectinas ou reagentes monoclonais.
La glicoforina B (GPB) porta i determinanti antigenici S (MNS3), s (MNS4) ed esprime in aggiunta l‘antigene ˝N˝. Alcuni sieri anti-N possono quindi crossreagire,
con emazie che portano l‘antigene M in doppia dose. Risultati inattesi possono inoltre verificarsi quando sono presenti varianti degli antigeni M e N,
per esempio il raro antigene Mg (MNS11) che è codificato da un gene che non produce antigeni M o N. Le emazie possono quindi essere erroneamente
classificate come NN o NM quando sono genotipicamente NMg o MMg. Mc (MNS8) è un altro allele raro di M e N che reagisce con la maggior parte dei
sieri anti-M e con alcuni anti-N. Me (MNS13) è un determinante condiviso dagli antigeni M e He e alcuni sieri anti-M possono anche avere una componente
anti-Me. Queste potenziali fonti di risultati discrepanti per la tipizzazione MN possono rivestire particolare importanza in test di studio familiare.
La Glicoforina B (GPB) expresa los determinantes antigénicos S (MNS3), s (MNS4) y también el antígeno ˝N˝. Algunos sueros anti-N pueden presentar
reactividad cruzada con hematíes portadores de doble dosis (homocigotos) del antígeno M. En presencia de antígenos M y N variantes pueden producirse
reacciones inesperadas, por ejemplo, el infrecuente antígeno Mg (MNS11) codificado por un gen que virtualmente no produce antígenos M o N; en este
caso, los hematíes pueden ser clasificados erróneamente como NN o NM, cuando genotípicamente son NMg o MMg. El Mc (MNS8) es otro alelo raro
de M y de N, reacciona con la mayoría de los sueros anti-M y de algunos anti-N. El Me (MNS13) es un determinante compartido por M y el antígeno He,
algunos sueros anti-M contiene un componente anti-Me. Estas fuentes potenciales de resultados discrepantes en el tipaje de los antígenos MN pueden
ser muy útiles en los estudios de paternidad.
A glucoforina B (GPB) tem determinantes antigénicos S (MNS3) e s (MNS4) e também expressa o antigénio ˝N˝. Alguns soros anti-N podem portanto ter
reacção cruzada com dose dupla do antigénio M. Podem ocorrer também resultados inesperados quando estejam presentes variantes dos antigénios
M e N, por exemplo, o antigénio raro Mg (MNS11) que é codificado por um gene que virtualmente não produz nenhum antigénio M nem N. Os eritrócitos
podem portanto ser erradamente classificados NN ou NM sendo eles de genótipo NMg ou MMg. O Mc (MNS8) é outro alelo raro do M e N que reage
com a maioria dos soros anti-M e alguns soros anti-N. O Me (MNS13) é um determinante partilhado pelos antigénios M e He e alguns soros anti-M
também contêm um componente anti-Me. Estas potenciais fontes de resultados discrepantes da tipagem MN podem ser de particular importância nos
testes de paternidade.
La determinación M y N también se realiza para ayudar a confirmar la especificidad de aloanticuerpos. Normalmente no se considera que los anticuerpos
anti-M y anti-N sean clínicamente significativos salvo que presenten reactividad a 37 °C. En ese caso, es importante la determinación MN de la sangre
del donante a fin de seleccionar unidades negativas respecto al antígeno correspondiente antes de las pruebas cruzadas.
Também se realiza a tipagem dos antigénios M e N a fim de auxiliar a confirmação da especificidade dos alo-anticorpos. Normalmente anti-M e anti-N
não são considerados como tendo relevância clínica, a menos que reajam a 37 °C. Nesse caso a tipificação de MN do sangue do dador torna-se importante,
para se poder seleccionar unidades negativas do antigénio apropriado antes do teste de compatibilidade.
REAGENTI
REACTIVOS
REAGENTES
Anticorpi monoclonali (ibridoma di topo), liquidi, in flaconi da 2 ml.
Pronti all’uso, non dilua!
Anticuerpos monoclonales (hibridoma murino), líquidos, en frascos de 2 ml.
Listos para usar, no diluya!
Anticorpos monoclonais (hibridomas de rato), líquido, em frascos de 2 ml.
Prontos a utilizar, não dilua!
Conservante: < 0,1% NaN3.
Conservante: < 0,1% NaN3.
Conservante: < 0,1% NaN3.
• ˝DiaClon Anti-M˝ (linea cellulare LM110/140 [LM1]).
• ˝DiaClon Anti-N˝ (linea cellulare LN3).
• ˝DiaClon Anti-M˝ (línea celular LM110/140 [LM1]).
• ˝DiaClon Anti-N˝ (línea celular LN3).
• ˝DiaClon Anti-M˝ (clone LM 110/140 [LM1]).
• ˝DiaClon Anti-N˝ (clone LN3).
Attenzione: Tutti i reagenti devono essere considerati potenzialmente infettivi.
Precaución: Todos los reactivos deben tratarse como potencialmente infecciosos.
Atenção: Todos os reagentes devem ser tratados como potencialmente infecciosos.
Stabilità: vedere la data di scadenza sull‘etichetta.
Estabilidade: ver prazo de validade no rótulo.
ALTRI REAGENTI OCCORRENTI
REACTIVOS ADICIONALES NECESARIOS
REAGENTES ADICIONAIS NECESSÁRIOS
•Soluzione salina isotonica allo 0,9% per la preparazione di sospensioni di emazie.
•Solución salina isotónica al 0,9% para preparar la suspensión de eritrocitos.
•Solução isotónica salina a 0,9% para suspensão de eritrócitos.
ALTRI MATERIALI OCCORRENTI
OTROS MATERIALES NECESARIOS
OUTROS MATERIAIS NECESSÁRIOS
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La determinazione degli antigeni M e N viene eseguita anche per confermare la specificità degli alloanticorpi. Gli anti-M e anti-N non vengono di norma
considerati clinicamente significativi a meno che non reagiscano a 37 °C. In questo caso, la tipizzazione MN del sangue del donatore è importante per
selezionare corrispondenti unità negative di antigene - negative prima della prova di compatibilità (crossmatching).
Provette per sospensione
Rack per provette
Pipette da 25 μl, 50 μl, 0,5 ml
Centrifuga per immunoematologia
Estabilidad: véase fecha de caducidad en la etiqueta.
Tubos de suspensión
Gradilla para tubos
Pipetas 25 μl, 50 μl, 0,5 ml
Centrífuga inmunohematológica
Tubos de suspensão
Suporte para tubos
Pipetas 25 μl, 50 μl, 0,5 ml
Centrífuga de imuno-hematologia
CAMPIONI
MUESTRAS
AMOSTRAS
Per ottenere risultati attendibili, si consiglia di eseguire la determinazione su un campione fresco o conforme alle procedure del laboratorio per i criteri di
accettazione dei campioni. I campioni devono essere prelevati preferibilmente in citrato, EDTA o CPD-A. Si possono comunque usare anche campioni
prelevati in provette normali (senza anticoagulante).
Para un resultado óptimo, la determinación debe realizarse con una muestra recién extraída, o cumpliendo la normativa local del laboratorio en cuanto a
criterios de aceptabilidad de las muestras. Preferiblemente, las muestras de sangre deben recogerse utilizando citrato, EDTA o CPD-A como anticoagulante.
También es posible utilizar muestras recogidas en tubos sin anticoagulante.
Para obtenção dos resultados ideais, a determinação deve ser realizada numa amostra recentemente colhida, ou em conformidade com os critérios de
aceitação do procedimento laboratorial local. As amostras de sangue devem, de preferência, ser colhidas em anticoagulante citrato, EDTA ou CPD-A.
Também é possível utilizar amostras colhidas em tubos limpos (sem anticoagulante).
PREPARAZIONE DEL CAMPIONE
PREPARACIÓN DE LA MUESTRA DE SANGRE
PREPARAÇÃO DA AMOSTRA DE SANGUE
Preparare una sospensione di emazie al 3–5% in soluzione salina isotonica nel modo seguente:
Prepare una suspensión de eritrocitos al 3–5% en solución salina isotónica como sigue:
Prepare uma suspensão de eritrócitos a 3–5% em solução isotónica salina do seguinte modo:
1. Pipettare 0,5 ml di soluzione salina isotonica in una provetta pulita.
2.Aggiungere 1 goccia (50 μl) di sangue intero o 25 μl di emazie concentrate, quindi mescolare delicatamente.
1. Pipetee 0,5 ml de solución salina isotónica en un tubo de vidrio limpio.
2.A ñada 1 gota (50 μl) de sangre completa o 25 μl de concentrado de eritrocitos y agite suavemente.
1. Dispense 0,5 ml de solução isotónica salina num tubo limpo de vidro.
2.Adicione 1 gota (50 μl) de sangue total ou 25 μl de concentrado de eritrócitos, misture suavemente.
CONTROLLI
CONTROLES
CONTROLOS
Si consiglia di includere sempre controlli noti positivi e negativi in accordo alle direttive vigenti in materia di garanzia di qualità.
Deben incluirse muestras positivas y negativas conocidas de acuerdo con las directrices de garantía de calidad aplicables.
Amostras positivas e negativas conhecidas devem ser incluídas em conformidade com as directrizes relevantes para controlo da qualidade.
PROCEDURA
PROCEDIMIENTO DE LA PRUEBA
PROCEDIMENTO DO TESTE
Test in provetta
Prueba en tubo
Teste em tubo
Prima dell‘uso portare i reagenti a temperatura ambiente (18–25 °C).
Deje que los reactivos alcancen la temperatura ambiente (18–25 °C) antes de utilizarlos.
Antes de utilizar, deixe os reagentes atingir a temperatura ambiente (18–25 °C).
1.Identificare una provetta pulita con nome o numero del paziente.
2.Pipettare 1 goccia (50 μl) del reagente ˝DiaClon Anti-M˝ e/o ˝DiaClon Anti-N˝ nelle corrispondenti provette.
3.Aggiungere 1 goccia (50 μl) della sospensione di eritrociti.
4.Miscelare bene e incubare per 5 minuti a temperatura ambiente (18–25 °C).
5.Centrifugare per 20 secondi a 1000 g o 1 minuto a 125 g.
6.Risospendere delicatamente gli eritrociti e, su una sorgente luminosa indiretta, sottoporre a osservazione macroscopica l’eventuale agglutinazione.
1.Identifique un tubo de vidrio limpio con el nombre o número del paciente.
2.Pipetee 1 gota (50 μl) del reactivo ˝DiaClon Anti-M˝ o ˝DiaClon Anti-N˝ en los tubos correspondientes.
3.A ñada 1 gota (50 μl) de la suspensión de eritrocitos.
4.Mezcle bien e incube durante 5 minutos a temperatura ambiente (18–25 °C).
5.Centrifugue 20 segundos a 1000 g ó 1 minuto a 125 g.
6.Resuspenda cuidadosamente los eritrocitos y realice una observación macroscópica sobre una fuente de luz indirecta comprobando si existe aglutinación.
1.Identifique um tubo de vidro limpo com o nome ou número do doente.
2.Pipete 1 gota (50 μl) de reagente ˝DiaClon Anti-M˝ e/ou ˝DiaClon Anti-N˝ para os tubos apropriados.
3.Adicione 1 gota (50 μl) de suspensão de eritrócitos.
4.Misture bem e incube durante 5 minutos à temperatura ambiente (18–25 °C).
5.Centrifugue durante 20 segundos a 1000 g ou durante 1 minuto a 125 g.
6.Volte a suspender suavemente os eritrócitos e verifique macroscopicamente sinais de aglutinação sobre uma fonte de luz indirecta.
DiaClon Anti-M / DiaClon Anti-N
DiaClon Anti-M / DiaClon Anti-N
Português
B103052 09.13
Español
DiaClon Anti-M / DiaClon Anti-N
B103052 09.13
Italiano
B103052 09.13
INTERPRETAÇÃO DOS RESULTADOS
INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS
INTERPRETAZIONE DEI RISULTATI
A) Princípio
A) Principio
A) Principio
Positivo:Uma aglutinação de + a ++++ é indicadora de reacção entre o anticorpo e os eritrócitos.
Positivo:Una aglutinación entre + y ++++ indica una reacción entre el anticuerpo y los eritrocitos.
Positivo:L‘agglutinazione da + a ++++ indica una reazione tra l‘anticorpo e le emazie
Negativo:A inexistência de aglutinação visível indica não ter ocorrido reacção entre o anticorpo e os eritrócitos.
Negativo:La ausencia de aglutinación visible indica que no se ha producido una reacción entre el anticuerpo y los eritrocitos.
Negativo:L‘assenza di agglutinazione visibile indica che non c‘è stata reazione tra l‘anticorpo e le emazie.
B)Reacções com ˝ DiaClon Anti-M˝ e ˝ DiaClon Anti-N˝
B)Reacciones con ˝ DiaClon Anti-M˝ y ˝ DiaClon Anti-N˝
B)Reazioni con ˝ DiaClon Anti-M˝ e ˝ DiaClon Anti-N˝
Uma reacção positiva indica a presença do antigénio M ou N.
Uma reacção negativa indica a ausência do antigénio M ou N.
Una reacción positiva indica la presencia del antígeno M o N.
Una reacción negativa indica ausencia del antígeno M o N.
Una reazione positiva indica la presenza dell‘antigene M o N.
Una reazione negativa indica l‘assenza dell‘antigene M o N.
OBSERVAÇÕES
OBSERVACIONES
NOTE
1.Certos estados patológicos, por exemplo mieloma múltiplo e síndroma das aglutininas frias (SAF) são conhecidos por provocarem a aglutinação
espontânea dos eritrócitos. Na maior parte dos casos a lavagem dos eritrócitos com solução isotónica salina tépida, antes do teste, resolve o problema.
2.Dada a natureza dos anticorpos monoclonais, ou seja, reconhecimento de um único epítopo, é possível verificar resultados discrepantes (força da
reacção) em comparação com soros teste policlonais de origem humana. Isto pode dever-se a variantes dos antigénios.
1.Está descrito que algunos estados patológicos, como el mieloma múltiple o la presencia de aglutinina frías, dan lugar a la agregación espontánea de los
eritrocitos. En la mayoría de los casos, el problema se resuelve lavando los eritrocitos con solución salina isotónica templada antes de realizar la prueba.
2.Por la propia naturaleza de los anticuerpos monoclonales, es decir, el reconocimiento de un único epítopo, pueden hallarse resultados discrepantes
(intensidad de la reacción) en comparación con sueros de origen humano o policlonales. Este fenómeno puede ser debido a la existencia de antígenos
variantes.
1.E’risaputo che certi stati patologici, ad esempio il mieloma multiplo e la crio-globulinemia (CAD), danno origine ad aggregazione spontanea di eritrociti.
Nella maggior parte dei casi, il problema si risolve lavando gli eritrociti con soluzione salina isotonica calda prima del test.
2.Data la natura degli anticorpi monoclonali, ad es. il riconoscimento di un unico epitopo, possono osservarsi risultati discrepanti (intensità di reazione)
rispetto ai risultati ottenuti con sieri di prova policlonali umani. Questo fenomeno può essere dovuto a varianti antigeniche.
LIMITAÇÕES
LIMITACIONES
LIMITAZIONI
a)A contaminação, bacteriana ou outra, dos materiais utilizados pode causar resultados falsamente positivos ou falsamente negativos.
b)O cumprimento estrito dos procedimentos e a utilização do equipamento recomendado são essenciais. O equipamento deve ser regularmente verificado
em conformidade com os procedimentos de BPL.
c)Suspensões de eritrócitos demasiado concentradas ou demasiado diluidas podem provocar resultados errados.
a)L a contaminación de los materiales empleados, bacteriana o de otro tipo, puede provocar reacciones falsamente positivas o falsamente negativas.
b)Es esencial atenerse estrictamente a los procedimientos y equipos recomendados. El equipo debe comprobarse periódicamente según la normativa
de prácticas de laboratorio correctas (GLP).
c)Las suspensiones de eritrocitos demasiado concentradas o demasiado diluidas pueden dar lugar a resultados aberrantes.
a)Contaminazioni batteriche o di altro tipo del materiale utilizzato possono essere causa di risultati falsamente negativi o positivi.
b)È indispensabile seguire scrupolosamente le istruzioni e impiegare il necessario materiale di lavoro. Il materiale di lavoro deve essere controllato
regolarmente secondo le direttive GLP.
c)Una sospensione di eritrociti troppo concentrata o troppo diluita può causare reazioni anomale.
BIBLIOGRAFIA
BIBLIOGRAFÍA
BIBLIOGAFIA
Mollison, P.L., Engelfriet, C.P. and Contreras, M.: Blood Transfusion in Clinical Medicine, 10 th ed. 1997; Blackwell Scientific Publications, Oxford.
Mollison, P.L., Engelfriet, C.P. and Contreras, M.: Blood Transfusion in Clinical Medicine, 10 th ed. 1997; Blackwell Scientific Publications, Oxford.
Mollison, P.L., Engelfriet, C.P. and Contreras, M.: Blood Transfusion in Clinical Medicine, 10 th ed. 1997; Blackwell Scientific Publications, Oxford.
PRODUTOS
PRODUCTOS
PRODOTTI
DiaClon Anti-M monoclonal
IgG antibody
for tube test
1 x 2 ml . . . . . . . . . . . . . . REF 103052
DiaClon Anti-M
monoclonal
IgG antibody
for tube test
1 x 2 ml . . . . . . . . . . . . . . REF 103052
DiaClon Anti-M
monoclonal
IgG antibody
for tube test
1 x 2 ml . . . . . . . . . . . . . . REF 103052
DiaClon Anti-N
monoclonal
IgG antibody
for tube test
1 x 2 ml . . . . . . . . . . . . . . . REF 103252
DiaClon Anti-N
monoclonal
IgG antibody
for tube test
1 x 2 ml . . . . . . . . . . . . . . . REF 103252
DiaClon Anti-N
monoclonal
IgG antibody
for tube test
1 x 2 ml . . . . . . . . . . . . . . . REF 103252
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