Amplification Kit

Amplification Kit
760-080
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precauzioni necessarie durante la manipolazione. Evitare il contatto di reagenti con
occhi, pelle e mucose. Indossare guanti e indumenti di protezione adeguati.
Consultare le autorità locali o statali in relazione al metodo di smaltimento
consigliato.
Per informazioni di sicurezza supplementari, fare riferimento alla Scheda dei dati di
sicurezza del prodotto e alla Guida dei simboli e delle frasi di rischio presenti sul sito
www.ventana.com.
ISTRUZIONI PER L'USO
USO PREVISTO
Ventana Medical Systems, Inc.’s (Ventana) Amplification Kit può essere utilizzato assieme
ai detection kit VENTANA per aumentare l'intensità del segnale degli anticorpi primari di
coniglio e di topo con una colorazione debole. Il kit deve essere utilizzato per la
colorazione qualitativa di tessuto fissato in formalina e incluso in paraffina, tessuto
congelato o preparazioni citologiche su VENTANA coloratori automatici di vetrini con
anticorpi primari VENTANA, detection kit e reagenti ausiliari.
L’interpretazione clinica di qualunque colorazione o assenza di colorazione deve essere
completata con studi morfologici e con una valutazione di controlli adeguati. Le valutazioni
devono essere effettuate da un patologo qualificato nel contesto dell’anamnesi clinica del
paziente e di altri test diagnostici.
Questo prodotto è indicato per uso diagnostico in vitro (IVD).
CRITERIO DELLA PROCEDURA
Amplification Kit utilizza catene pesanti e leggere di IgG di coniglio anti-topo e IgG di topo
anti-coniglio per legarsi all'anticorpo primario, aumentando il numero di anticorpi legati al
sito dell'antigene e aumentando l'intensità di colorazione.
MATERIALI E METODI
Reagente fornito
Amplification Kit contiene una quantità di reagente sufficiente per 100 test.
Un erogatore da 10 mL di Amplifier A contiene circa 4 µg/mL di anticorpo prediluito a
catene pesanti e leggere di IgG di coniglio anti-topo in soluzione salina tamponata con
fosfato con ProClin 300, un conservante
Un erogatore da 10 mL di Amplifier B contiene circa 5 µg/mL di di anticorpo prediluito a
catene pesanti di IgG di topo anti-coniglio in soluzione salina tamponata con fosfato con
ProClin 300, un conservante.
Ricostituzione, miscelazione, diluizione, titolazione
Non è necessaria alcuna ricostituzione, miscelazione, diluizione o titolazione. Un'ulteriore
diluizione può ridurre la specificità della colorazione. L'utente deve convalidare qualunque
modifica di questo genere.
Per il protocollo di colorazione consigliato fare riferimento al foglietto illustrativo contenuto
nella confezione del detection kit in questione e al manuale d'istruzioni dello strumento per
indicazioni più dettagliate e opzioni di protocollo aggiuntive.
Il kit contiene due erogatori, un erogatore di catene pesanti e leggere di IgG di coniglio
anti-topo (Amplifier A) e un erogatore di catene pesanti di IgG di topo anti-coniglio
(Amplifier B). Amplifier A si lega specificamente all'immunoglobulina di topo presente sulla
sessione di tessuto e Amplifier B si lega specificamente al coniglio. Possono verificarsi
perdita di espressione o espressione inattesa di antigene, specialmente nei neoplasmi.
Occasionalmente gli elementi stromali che circondano cellule e strutture fortemente
colorate mostreranno immunoreattività.
Amplification Kit è caricato sul carosello sul VENTANA BenchMark GX, BenchMark
ULTRA, e BenchMark XT sulla strumentazione. Amplification Kit è applicato
automaticamente come richiesto per l'esecuzione della procedura. Per istruzioni
dettagliate e informazioni sulle opzioni di protocollo aggiuntive, consultare il manuale
d'istruzioni dello strumento.
PRESTAZIONI
La specificità di Amplification Kit è stata determinata da uno studio clinico che ha
dimostrato la colorazione appropriata delle cellule utilizzando catene pesanti e leggere di
IgG di coniglio anti-topo e catene pesanti di IgG di topo anti-coniglio. Ventana ha testato
vari tessuti normali in cui tessuti fissati in formalina e inclusi in paraffina sono stati colorati
con iVIEW DAB Detection Kit, Alkaline Phosphatase Red Detection Kit, Basic AEC
Detection Kit, e ultraView Universal DAB Detection Kit (utilizzando tre anticorpi diversi con
ciascun rilevamento). Amplification Kit è stato selezionato fra 33 blocchi di tessuto di 11
tipi diversi di tessuto. I tessuti colorati erano i seguenti: rene, colonna vertebrale, esofago,
intestino, cute, mammella, tonsilla, fegato, tiroide, muscolo e pancreas. Il controllo
negativo è stato selezionato come anticorpo primario per determinare se una colorazione
non specifica si verifica con reagenti di amplificazione. È stata osservata colorazione di
fondo non specifica occasionale in epitelio, tessuto connettivo, neuroblasti, muscoli lisci,
epatociti, cellule colloidali e insulari; ma nessuna colorazione né risultati inattesi, tali da
interferire con l'uso previsto del presente prodotto, si sono manifestati in questo studio.
La riproducibilità all'interno dello stesso ciclo e tra cicli diversi ha determinato che tutti i
vetrini sono stati colorati con la stessa intensità di colorazione.
Materiali necessari ma non forniti
RISOLUZIONE DEI PROBLEMI
I reagenti, come gli anticorpi primari, le sonde e i detection kit VENTANA e i componenti
ausiliari, non sono forniti.
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2.
Conservazione e manipolazione
Da conservare a 2-8 °C. Non congelare.
Per garantire la corretta erogazione di reagente e la stabilità dell'anticorpo, dopo ogni
utilizzo riposizionare il tappo e riporre immediatamente l'erogatore in frigorifero in
posizione verticale.
Questo reagente è provvisto di data di scadenza. Se conservato adeguatamente, il
reagente resta stabile fino alla data indicata sull'etichetta. Non utilizzare il reagente oltre la
data di scadenza indicata.
Se non tutta la paraffina è stata rimossa, è possibile che non ci sia alcuna
colorazione. Ripetere la procedura di sparaffinatura.
Per informazioni sulle azioni correttive, fare riferimento al manuale d'istruzioni del
coloratore automatico di vetrini oppure rivolgersi al rappresentante locale.
PROPRIETÀ INTELLETTUALE
BENCHMARK, ultraView, VENTANA, e il logo VENTANA sono marchi di Roche.
Tutti gli altri marchi sono di proprietà dei rispettivi titolari.
Ventana Medical Systems, Inc. concede all'Acquirente una licenza ad uso singolo in base
ai brevetti statunitensi n. 6045759, 6945128 e 7378058, e loro corrispettivi esteri.
© 2012 Ventana Medical Systems, Inc.
AVVERTENZE E PRECAUZIONI
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Per uso diagnostico in vitro (IVD).
Adottare le necessarie precauzioni durante la manipolazione dei reagenti. Evitare il
contatto di reagenti con occhi, pelle e mucose. Indossare guanti e indumenti di
protezione adeguati.
Evitare la contaminazione microbica del prodotto, poiché ciò potrebbe originare
risultati non corretti.
ProClin 300 viene utilizzato come conservante nella soluzione. È classificato come
irritante e può causare la sensibilizzazione della cute. Si raccomanda di adottare le
2012-04-25
FT0700-450a
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PER ULTERIORI INFORMAZIONI
Ventana Medical Systems, Inc.
1910 E. Innovation Park Drive
Tucson, Arizona 85755
USA
+1 520 887 2155
+1 800 227 2155 (USA)
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Sandhofer Strasse 116
D-68305 Mannheim
Germany
2012-04-25
FT0700-450a
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